小鼠免疫球蛋白M(IgM) ELISA 試劑盒
本試劑盒基于檢測(cè)樣本的特異性抗體包被酶標(biāo)板,加入待測(cè)樣本,樣本與包被在酶標(biāo)板上的特異性抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。清洗后加入酶標(biāo)二抗,與免疫復(fù)合物結(jié)合,形成完整的三明治復(fù)合物。再加入底物溶液,底物在酶的作用下變色,顏色的深淺與樣本的濃度呈正相關(guān)。加入終止液,使反應(yīng)停止,在450nm波長(zhǎng)下測(cè)量各孔的光密度值(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣本的濃度。

僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T(可拆)
產(chǎn)品數(shù)量:咨詢(xún)
產(chǎn)品應(yīng)用:ELISA實(shí)驗(yàn)
產(chǎn)品貨期:現(xiàn)貨
有效期:6個(gè)月
保存條件:2-8℃
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑盒組成
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | |
酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品:36U/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標(biāo)試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 抗原包被:將抗原溶液加入到酶標(biāo)板孔中,包被抗原,使其在孔底形成一層薄膜。
2. 清洗:清洗酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的抗原和其他雜質(zhì)。
3. 阻斷:加入阻斷液,封閉酶標(biāo)板孔中的非特異性結(jié)合位點(diǎn),以減少非特異性結(jié)合。
4. 清洗:清洗酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的阻斷液和其他雜質(zhì)。
5. 加樣:加入待測(cè)樣本,使其與抗原發(fā)生特異性結(jié)合。
6. 清洗:清洗酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的樣本和其他雜質(zhì)。
7. 加酶標(biāo)抗體:加入酶標(biāo)記的抗體,使其與特異性結(jié)合的樣本中的待測(cè)物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)。
8. 清洗:清洗酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體和其他雜質(zhì)。
9. 顯色反應(yīng):加入底物溶液,發(fā)生酶催化反應(yīng),產(chǎn)生有色產(chǎn)物。
10. 終止反應(yīng):加入終止液,停止酶催化反應(yīng)。
11. 檢測(cè):用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔的光密度值,記錄數(shù)據(jù)。

結(jié)果判斷:
1. 每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值減去空白孔的OD值后作圖,如設(shè)置復(fù)孔,則應(yīng)取其平均值計(jì)算。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。亦可以O(shè)D值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
2. 推薦使用業(yè)的曲線(xiàn)制作軟件,如curve expert 1.3或1.4,在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值,由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度,乘以稀釋倍數(shù);亦可將樣品的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的擬合方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
3. 若樣品OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測(cè),計(jì)算濃度時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。

ELISA試劑盒的作用
ELISA試劑盒是一種用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的特定抗體的試劑盒,例如抗人類(lèi)戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)試劑盒。
ELISA試劑盒基于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),以用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過(guò)各種化學(xué)合成方法制備。
ELISA試劑盒具有靈敏度高、特異性好、操作簡(jiǎn)便、安全、快速等優(yōu)點(diǎn),可以用于檢測(cè)類(lèi)風(fēng)濕因子、病毒、細(xì)菌等,在臨床診斷、科研和生物制品檢測(cè)等域具有廣泛的應(yīng)用。

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