雞L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒

雞L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒，預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。

雞L苯丙氨酸解氨酶(PAL)elisa試劑盒 是我司的熱銷(xiāo)產(chǎn)品之一，公司秉承“高品質(zhì)、低價(jià)格、快發(fā)貨”的服務(wù)理念，誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)，價(jià)格實(shí)惠，質(zhì)量保證。在長(zhǎng)期的銷(xiāo)售實(shí)踐中，我們形成了獨(dú)特的市場(chǎng)優(yōu)勢(shì)產(chǎn)品齊全、價(jià)格合理、經(jīng)營(yíng)穩(wěn)健、信息反饋及時(shí)、并能隨時(shí)隨地享受最直接、最周到、最完善的售后服務(wù)。我司多年為各大院校，各類(lèi)醫(yī)院，生物工程醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)室以及其他行業(yè)科研消費(fèi)者提供最全面、最周到的采購(gòu)，上海岑特歡迎您的來(lái)電訂購(gòu)！


 

名稱(chēng)：雞L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒
供應(yīng)商：岑特生物
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
方法：酶聯(lián)免疫法/酶免法（ELISA kit）
試劑盒成分：酶標(biāo)板，試劑，標(biāo)準(zhǔn)品等。
預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
經(jīng)營(yíng)種類(lèi)：國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口原裝/進(jìn)口分裝
產(chǎn)品用途：科研實(shí)驗(yàn)，不能用于臨床應(yīng)用
試劑盒保存：2-8℃（長(zhǎng)期不使用時(shí)，部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下）
備注：本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷
保質(zhì)期：6個(gè)月，所有試劑盒均提供最新批次。
種屬：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物elisa試劑盒等。
elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟包括：從包被，封閉，加樣，洗滌，加顯色底物，終止液加入，到讀書(shū)操作，還有標(biāo)準(zhǔn)曲線制作等詳盡的操作說(shuō)明。




ELISA的主要常用類(lèi)型及步驟：
1. 間接法測(cè)抗體
間接法是檢測(cè)抗體常用的方法。其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體(二抗)以檢測(cè)與固相抗原結(jié)合的受檢抗體，故稱(chēng)為間接法。操作步驟如下：
1)將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗原，洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
2)加稀釋的樣本，保溫反應(yīng)。樣本中的特異抗體與固相抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體，樣本中的其他成份在洗滌過(guò)程中被洗去。
3)加酶標(biāo)抗抗體。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗抗體結(jié)合，從而間接地標(biāo)記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量與樣本中受檢抗體的量正相關(guān)。
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定性測(cè)定
(1)陽(yáng)性判定值法(cut-off value，CO值)：一般為陰性對(duì)照的平均A值加一個(gè)常數(shù)，試劑制備嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化，要先計(jì)算出陽(yáng)性對(duì)照A值平均數(shù)和陰性對(duì)照A值平均數(shù)。標(biāo)本A值≥CO值即為陽(yáng)性。
(2)抑制率法：在競(jìng)爭(zhēng)抑制法中結(jié)果可用抑制率表示。
抑制率(％)＝(A陰性對(duì)照A- A待測(cè))／陰性對(duì)照X100％,一般以抑制率≥50％為陽(yáng)性
2）半定量測(cè)定 結(jié)果一般以滴度表示。將標(biāo)本連續(xù)稀釋后，進(jìn)行ELISA檢測(cè)，在陽(yáng)性臨界值以上的最高稀釋度即為該標(biāo)本的“滴度”。
3）定量測(cè)定 即用己知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測(cè)定，與待測(cè)標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行測(cè)定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果以絕對(duì)量或活性單位表示之。




雞L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒  操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。





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