雞新城疫抗體檢測(cè)試劑盒操作說明

雞新城疫抗體檢測(cè)試劑盒操作說明，雞新城疫抗體檢測(cè)試劑盒適用于雞血清中新城疫病毒特異性抗體的檢測(cè)，可用于雞新城疫疫苗免疫效果評(píng)價(jià)。

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名稱：雞新城疫病毒IgG抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名：Diagnostic Kit for chicken Antibodies to Newcastle Disease Virus (ELISA)
供應(yīng)商：岑特生物
產(chǎn)地：國(guó)產(chǎn)|進(jìn)口
檢測(cè)樣本：血清
檢測(cè)方法：酶聯(lián)免疫法
產(chǎn)品規(guī)格：96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒
保質(zhì)期：12個(gè)月
儲(chǔ)藏：4～30℃密封干燥保存，忌冷凍，避免陽光直射。
預(yù)期用途：雞新城疫是由新城疫病毒（Newcastle Disease Virus，NDV）引起的一種高度接觸性傳染病，又稱亞洲雞瘟或偽雞瘟。主要特征是呼吸困難、便稀、神經(jīng)紊亂、粘膜和漿膜出血。
雞新城疫抗體檢測(cè)試劑盒適用于雞血清中新城疫病毒特異性抗體的檢測(cè)，可用于雞新城疫疫苗免疫效果評(píng)價(jià)。





雞新城疫抗體檢測(cè)試劑盒操作說明【試驗(yàn)原理】
雞新城疫抗體檢測(cè)試劑盒系由預(yù)包被新城疫病毒（NDV）抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測(cè)雞血清或血漿中新城疫病毒特異性抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)，在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和稀釋的待檢血清，經(jīng)溫育后，若樣品中含有新城疫病毒的特異性抗體，則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后；再加入酶標(biāo)記物，與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，在孔中加TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有特異性抗體。



【操作步驟】
1. 將試劑回溫至室溫，通過顛倒和渦旋將試劑混勻。
2. 將1份4×樣品稀釋液加入到含3份去離子水的容器中，充分混勻，例如，30ml 4×樣品稀釋液加入到90ml去離子水中。
3. 將1份20×洗滌液加入到含19份去離子水的容器中，充分混勻，例如，25ml 20×洗滌液加入到475ml去離子水中。
4. 稀釋前將陽性對(duì)照、陰性對(duì)照和樣品震蕩均勻。
5. 陽性對(duì)照、陰性對(duì)照和樣品均需要用樣品稀釋液稀釋后使用。稀釋比例為2μl ：800μl。將移液器調(diào)到100μl，反復(fù)吹打4次使之充分混勻。
6. 將稀釋后的陰性對(duì)照、陽性對(duì)照分別加入微孔中，每種做兩個(gè)平行，每孔100μl；將稀釋后的樣品100μl分別加入孔中，室溫下靜置30分鐘。
7. 棄去微孔板中溶液，每孔加入300μl洗滌液洗滌，重復(fù)洗滌2次，在洗滌過程中防止酶標(biāo)板變干。
8. 每孔立即加入100μl結(jié)合物，室溫靜置30分鐘。
9. 重復(fù)步驟7進(jìn)行洗板。
10. 每孔立即加入100μl底物，室溫靜置30分鐘。
11. 不要倒掉板內(nèi)液體，每孔立即加入100μl終止液。
12. 用酶標(biāo)儀雙波讀數(shù)（405nm或410nm作為主要波長(zhǎng)，630nm或650nm為參考波長(zhǎng)），計(jì)算結(jié)果。



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