上海優(yōu)選 猴(Monkey)γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測(cè)試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
上海優(yōu)選 猴(Monkey)γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白;按照說(shuō)明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。上海優(yōu)選 猴(Monkey)γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測(cè)試劑盒組成
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無(wú) |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無(wú) |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無(wú) |
檢測(cè)抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無(wú) |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無(wú) |
底物B | 6mL | 3mL | 無(wú) |
終止液 | 6mL | 3mL | 無(wú) |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無(wú) |
說(shuō)明書 | 1份 | 1份 | 無(wú) |
自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | 無(wú) |
注:標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S5)濃度依次請(qǐng)?jiān)斣冸娫?8738342567 ,QQ:2749264338
試劑的準(zhǔn)備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
上海優(yōu)選 猴(Monkey)γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
試劑盒上海優(yōu)選 猴(Monkey)γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測(cè)試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:最低檢測(cè)濃度小于1.0 pg/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個(gè)月
免責(zé)聲明
1. 上海優(yōu)選 猴(Monkey)γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測(cè)試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
00112 Fmoc-Ala-OH 35661-39-3
00113 Fmoc-D-Ala-OH 79990-15-1
02308 Fmoc-β-Ala-OH/35737-10-1
00216 Fmoc-Arg-OH/91000-69-0
00226 Fmoc-Arg(Tos)-OH/83792-47-6
00222 Fmoc-Arg(Pbf)-OH 154445-77-9
00317 Fmoc-Asn(Trt)-OH 132388-59-1
00424 Fmoc-Asp(OtBu)-OH 71989-14-5
00636 Fmoc-Cys(Trt)-OH 103213-32-7
00772 Fmoc-Glu(OtBu)-OH 71989-18-9
00732 Fmoc-Glu(Bzl)-OH 123639-61-2
00814 Fmoc-Gln(Trt)-OH 132327-80-1
00907 Fmoc-Gly-OH 29022-11-5
01014 Fmoc-His(Trt)-OH 109425-51-6
01218 Fmoc-IIe-OH 71989-23-6
01311 Fmoc-Leu-OH 35661-60-0
01310 Fmoc-D-Leu-OH 114360-54-2
01437 Fmoc-Lys(Boc)-OH 71989-26-9
01450 Fmoc-Lys(Z)-OH 86060-82-4
01511 Fmoc-Met-OH 71989-28-1
01617 Fmoc-Phe-OH 35661-40-6
01616 Fmoc-D-Phe-OH 86123-10-6
01711 Fmoc-Pro-OH 71989-31-6
01822 Fmoc-Ser(tBu)-OH 71989-33-8
01918 Fmoc-Thr(tBu)-OH 71989-35-0
02017 Fmoc-Trp(Boc)-OH 143824-78-6
02016 Fmoc-D-Trp(Boc)-OH 163619-04-3
02117 Fmoc-Tyr-OH 92954-90-0
02121 Fmoc-Tyr(tBu)-OH 71989-38-3
02214 Fmoc-Val-OH 68858-20-8
00812 Fmoc-Gln-OH 71989-20-3
00315 Fmoc-Asn-OH/71989-16-7
00314 Fmoc-D-Asn-OH/108321-39-7
00457 Fmoc-Asp-OH/119062-05-4
00460 Fmoc-D-Asp(OtBu)-OH/112883-39-3
00422 Fmoc-Asp(OBzl)-OH/86060-84-6
00631 Fmoc-Cys(Bzl)-OH/53298-33-2
00732 Fmoc-Glu(OBzl)-OH/123639-61-2
00736 Fmoc-Glu(OtBu)-OH·H2O/204251-24-1
00770 Fmoc-D-Glu(OtBu)-OH/104091-08-9
01218 Fmoc-lle-OH/71989-23-6
01439 Fmoc-Lys(2-Cl-Z)-OH/133970-31-7
01437 Fmoc-Lys(Boc)-OH/71989-26-9
01436 Fmoc-D-Lys(Boc)-OH/ 92122-45-7
01510 Fmoc-D-Met-OH/112883-40-6
01710 Fmoc-D-Pro-OH/101555-62-8
01819 Fmoc-Ser-OH/73724-45-5
01820 Fmoc-Ser(Bzl)-OH/83792-48-7
01915 Fmoc-Thr-OH·H2O/73731-37-0
01916 Fmoc-Thr(Bzl)-OH/117872-75-0
02015 Fmoc-Trp-OH/35737-15-6
02014 Fmoc-D-Trp-OH/86123-11-7
02191 Fmoc-Tyr(Bzl)-OH/71989-40-7
08716 Fmoc-Orn(Boc)-OH/109425-55-0
01821 Fmoc-D-Ser(tBu)-OH/128107-47-1
Fmoc-His(Tos)-OH/ 112380-10-6
00106 Boc-Ala-OH 15761-38-3
00105 Boc-D-Ala-OH 7764-95-6
00138 Boc-MeAla-OH 16948-16-6
00406 Boc-Asp-OH 13726-67-5
00412 Boc-Asp(OBzl)-OH 7536-58-5
00623 Boc-Cys(Trt)-OH 21947-98-8
00903 Boc-Gly-OH 4530-20-5
01418 Boc-Lys(Fmoc)-OH 84624-27-1
01804 Boc-D-Ser-OH 6368-20-3
01908 Boc-Thr-OH 2592-18-9
02007 Boc-D-Trp-OH 5241-64-5
06105 Boc-Har-OH.HCl 128719-65-3
07904 Boc-Tle-OH 62965-35-9
08605 Boc-Nva-OH 53308-95-5
15204 Boc-L-Phe(4-I)-OH 62129-44-6
16105 Boc-D-4-NO2-Phe-OH 61280-75-9
01608 Boc-D-Phe-OH 18942-49-9
01305 Boc-D-Leu-OH.H2O 16937-99-8
01424 Boc-Lys(Z)-OH 2389-45-9
21504 Boc-L-Cyclopentylglycine 109183-72-4
11204 Boc-L-4-Br-Phe-OH 62129-39-9
00212 Boc-Arg(NO2)-OH/2188-18-3
00211 Boc-D-Arg(NO2)-OH/50913-12-7
01118 Boc-Hyp-Ome/74844-91-0
00206 Boc-D-Arg-OH·HCl·H2O/114622-81-0
00207 Boc-Arg-OH·HCl·H2O/35897-34-8
00310 Boc-Asn(Trt)-OH/132388-68-2
00405 Boc-D-Asp-OH/62396-48-9
00621 Boc-Cys(Bzl)-OH/5068-28-0
00714 Boc-Glu(OBzl)-OH/13574-13-5
01006 Boc-His-OH/17791-52-5
01306 Boc-Leu-OH·H2O/13139-15-6
01305 Boc-D-Leu-OH·H2O/16937-99-8
01416 Boc-Lys(Boc)-OH·DCHA/15098-69-8
01418 Boc-Lys(Fmoc)-OH/84624-27-1
014167 Boc-D-Lys(Fmoc)-OH/ 115186-31-7
01506 Boc-Met-OH/2488-15-5
08712 Boc-Orn(Z)-OH/2480-93-5
01609 Boc-Phe-OH/13734-34-4
01706 Boc-Pro-OH/15761-39-4
01805 Boc-Ser-OH/3262-72-4
01810 Boc-Ser-Ome/2766-43-0
01808 Boc-Ser-Obzl/59524-02-6
01813 Boc-Ser(Bzl)-OH/23680-31-1
01911 Boc-Thr(Bzl)-OH/15260-10-3
02008 Boc-Trp-OH/13193-14-5
02108 Boc-Tyr-OH/3978-80-1
02112 Boc-Tyr(Bzl)-OH/2130-96-3
02207 Boc-Val-OH/13734-41-3
01027 Boc-His(Tos)-OH/ 35899-43-5
00214 Boc-Arg(Tos)-OH/ 13836-37-8
Boc-Cys(pMeOBzl)-OH
Boc-Glu(OcHex)-OH
01714 Z-Pro-OH 1148-11-4
01826 Z-D-Ser-OH 6081-61-4
02309 Z-Beta-Ala-OH 2304-94-1
01224 Z-lle-OH 3160-59-6
01621 Z-Phe-OH 1161-13-3
02223 Z-Val-NCA 158257-41-1
09708 Z-D-Phg-OH 17609-52-8
09709 Z-Phg-OH 53990-33-3
00117 Z-Ala-OH/1142-20-7
00118 Z-D-Ala-OH/26607-51-2
00230 Z-Arg-OH/1234-35-1
00229 Z-Arg-OH·HCl/56672-63-0
00325 Z-Asn-OH/2304-96-3
00327 Z-Asn(Trt)-OH/132388-57-9
00426 Z-Asp-OH/1152-61-0
00433 Z-Asp(OBzl)-OH/3479-47-8
00639 Z-Cys(Bzl)-OH/3257-18-9
00741 Z-Glu-OH/1155-62-0
00744 Z-Glu(OBzl)-OH/5680-86-4
00818 Z-Gln-OH/2650-64-8
00911 Z-Gly-OH/1138-80-3
01235 Z-Ile-OH.DCHA/26699-00-3
01316 Z-Leu-OH/2018-66-8
01480 Z-Lys(Boc)-OH.DCHA/2212-76-2
01620 Z-D-Phe-OH/2448-45-5
01713 Z-D-Pro-OH/6404-31-5
01827 Z-Ser-OH/1145-80-8
01848 Z-DL-Ser-OH/2768-56-1
01829 Z-Ser-Ome/1676-81-9
01830 Z-Ser(Bzl)-OH/20806-43-3
01832 Z-Ser(tBu)-OH/1676-75-1
01921 Z-Thr-OH/19728-63-3
01926 Z-Thr(Bzl)-OH/69863-36-1
02018 Z-D-Trp-OH/2279-15-4
02219 Z-Val-OH/1149-26-4
02218 Z-D-Val-OH/1685-33-2
上海金穗生物提供高純度 γ-氨基丁酸,高品質(zhì),藥物中間體。產(chǎn)品貨期快、海量庫(kù)存,質(zhì)量有保證,歡迎來(lái)電詢價(jià)或在線咨詢!、
"γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)品英文名:γ-aminobutyricacid純度:HPLC≥99%規(guī)格:100mg/支價(jià)格:60元CAS:CAS:56-12-2產(chǎn)品編號(hào):JS91003
γ-氨基丁酸不能用于臨床,只能用于科研實(shí)驗(yàn)或者是醫(yī)院檢測(cè)試驗(yàn),試驗(yàn)需按照國(guó)家判斷標(biāo)準(zhǔn)。本公司提供優(yōu)質(zhì)的分子生物學(xué)試劑和試劑盒、培養(yǎng)基和培養(yǎng)耗材、透析袋及常用化學(xué)試劑等,大量現(xiàn)貨火爆促銷中,價(jià)格優(yōu)惠,歡迎來(lái)電咨詢!
一、AT6101便攜式γ譜儀_主要特點(diǎn):
1. 搜索、跟蹤、識(shí)別放射性核素,可識(shí)別數(shù)十種核素:
自然(標(biāo)準(zhǔn)):40K、232Th、238U
工業(yè):241Am、133Ba、57Co、60Co、137Cs、192Ir、226Ra、228Th、22Na、54Mn、152Eu、75Se
醫(yī)學(xué):67Ga、123I、125I、131I、111In、99mTc、201Tl、133Xe、51Cr
2. 測(cè)量 gamma 輻射的能量分布、環(huán)境gamma 輻射的劑量當(dāng)量率、alpha和 beta輻射流量密度。
3. 譜儀智能探頭帶有計(jì)算機(jī)接口。
4. 搜索模式。
5. 通過(guò)轉(zhuǎn)化“譜圖劑量”來(lái)實(shí)現(xiàn)譜儀對(duì)劑量率的測(cè)量。
6. 主機(jī)(PU)內(nèi)置 G-M 管, 可擴(kuò)展劑量率測(cè)量范圍。
7. 帶自動(dòng)本底扣除的劑量率和流量密度的測(cè)量。
8. 連續(xù)自動(dòng)LED 穩(wěn)定譜圖能量刻度,有KCl 進(jìn)行周期校準(zhǔn)。
9. 通過(guò)內(nèi)置溫度傳感器進(jìn)行測(cè)量路徑的溫度補(bǔ)償。
10. 搜索識(shí)別gamma 輻射核素過(guò)程中、劑量率和流量密度超限時(shí),以期可視聽報(bào)警。
11. 可采集300譜圖。
12. LCD 128x64 背光燈顯示譜圖數(shù)據(jù)。
13. 寬操作溫度范圍。
14. 水中密封,尺寸121x477 mm。
二、AT6101便攜式γ譜儀_產(chǎn)品架構(gòu):
主機(jī)(AT6101)+ 探頭
三、AT6101便攜式γ譜儀_檢測(cè)參數(shù):
1. 核素識(shí)別。
2. 劑量當(dāng)量和劑量當(dāng)量率(x、γ輻射)。
3. 流量密度(alpha和 beta輻射)。
獲取AT6101便攜式γ譜儀詳細(xì)資料請(qǐng)到下載中心www.mingtan100.com 下載《AT6101便攜式γ譜儀》或致電我公司。
主要用途:
FD-3013H智能化χ-γ輻射儀采用一體化結(jié)構(gòu),微計(jì)算機(jī)技術(shù),具有良好的能量響應(yīng)。適合于地質(zhì)、礦山、輻射環(huán)境、放射衛(wèi)生、商檢、建筑材料、核電、探傷、輻照及科研院所輻射場(chǎng)所的χ或γ放射性檢測(cè)工作。
主要特點(diǎn):
1、靈敏度高:采用NaI(TI)晶體
2、觸摸式鍵盤及中文提示,操作方便
3、建立時(shí)間快:每秒顯示一次
4、字符點(diǎn)陣式液晶顯示
5、報(bào)警設(shè)置靈敏、靈活
6、測(cè)量顯示單位為國(guó)際統(tǒng)一單位
7、具有良好的能量響應(yīng)
8、具有電池欠壓提示報(bào)警功能
技術(shù)指標(biāo):
1、探測(cè)器:30×25mm,NaI(TI)晶體
2、靈敏度:350cpm/μSv
3、能量響應(yīng):0.06-3.0Mev≤±30%
4、測(cè)量范圍:0.01~200μSv/h
5、讀數(shù)顯示:五位數(shù)字以μSv/h為單位給出測(cè)量結(jié)果
6、報(bào)警閾:0.25μSv/h ; 0.5μSv/h; 2.5μSv/h ; 10μSv/h ; 20μSv/h ; 100μSv/h ; 200μSv/h
7、欠壓報(bào)警:電池電壓降至2.2v時(shí),有中文“請(qǐng)更換電池”提示和聲響
8、測(cè)量精度:以置信度95%時(shí),一次讀數(shù):0~10μSv/h≤± 5% 10~200μSv/h≤±10%
9、測(cè)量時(shí)間:每秒測(cè)量,顯示當(dāng)前3秒平均值
10、功耗:200mW
11使用環(huán)境:-100C-+500 C,相對(duì)濕度(在+400 C溫度下)98%的極限條件下,其相對(duì)誤差10%
12、重量:1.2kg(包括二節(jié)一號(hào)電池)
產(chǎn)品描述
英文名稱 | Human IFN-γ (Interferon Gamma) ELISA Kit | ||
中文名稱 | 人γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 | ||
貨號(hào) | E-EL-H0108c | 種屬 | Human/人 |
規(guī)格 | 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips) | ||
檢測(cè)方法 | 雙抗體夾心法 | ||
檢測(cè)范圍 | 15.625~1000pg/mL | 靈敏度 | 9.375pg/mL |
基本原理
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人干擾素-γ抗體(IFN-Γ)酶聯(lián)免疫檢測(cè)
試劑盒使用說(shuō)明書
使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于生物素雙抗原夾心技術(shù)原理,來(lái)檢測(cè)人干擾素-γ抗體(IFN-Γ)),只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。
用 途: 用于人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中干擾素-γ抗體(IFN-Γ)的測(cè)定。
工作原理
本試劑盒采用的是生物素雙抗原夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定樣品中人干擾素-γ抗體(IFN-Γ)的水平。向預(yù)先包被了人干擾素-γ抗原(IFN-Γ)的酶標(biāo)孔中加入干擾素-γ抗體(IFN-Γ),溫育;溫育后,加入生物素標(biāo)記的IFN-Γ抗原,再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶,然后加入底物A、B,產(chǎn)生藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺與樣品中人干擾素-γ抗體(IFN-Γ)的濃度呈正相關(guān)。
試劑盒組成
1 | 標(biāo)準(zhǔn)品(480ng/ml) | 0.5ml | 7 | 顯色劑A液 | 6ml |
2 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 3ml | 8 | 顯色劑B液 | 6ml |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12孔×8條 | 9 | 終止液 | 6ml |
4 | 鏈霉親和素-HRP | 6ml | 10 | 說(shuō)明書 | 1份 |
5 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 生物素標(biāo)記的IFN-Γ抗原 | 1ml | 12 | 密封袋 | 1個(gè) |
需要而未提供的試劑和器材
1. 37℃恒溫箱。
2. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
3. 精密移液器及一次性吸頭
4. 蒸餾水,
5. 一次性試管
6. 吸水紙
注意事項(xiàng)
1. 從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其性,以避免試驗(yàn)誤差。
3. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
4. 為避免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。
5. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
6. 底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。
洗板方法
手工洗板方法:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。
標(biāo)本要求
1.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
操作程序
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:(本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶請(qǐng)按照說(shuō)明自行在小試管中倍比稀釋):
240ng/ml | (5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 120μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
120ng/ml | (4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 120μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
60ng/ml | (3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 120μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
30ng/ml | (2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 120μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
15ng/ml | (1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 120μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3. 加樣:1)空白孔:空白對(duì)照孔不加樣品,生物素標(biāo)記的IFN-Γ抗原,鏈霉親和素-HRP,只加顯色劑A&B和終止液,其余各步操作相同;2)標(biāo)準(zhǔn)品孔:加入標(biāo)準(zhǔn)品50μl,鏈霉素-HRP50μl(標(biāo)準(zhǔn)品中已事先整合好生物素抗體,故不加);3)待測(cè)樣品孔:加入樣本40μl,然后各加入IFN-Γ抗原10μl、鏈酶親和素-HRP50μl,蓋上封板膜,輕輕振蕩混勻,37℃溫育60分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘。
7. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
8. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后10分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。
操作程序總結(jié):
準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,生物素標(biāo)記抗原和酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)60分鐘
洗板5次,加入顯色液A、B,37℃顯色10分鐘
加入終止液
10分鐘之內(nèi)讀OD值
計(jì)算
檢測(cè)范圍:1ng/ml→400ng/ml。
規(guī)格: 96T/盒
保存: 2-8℃
期: 6個(gè)月(2-8℃)。