植物維生素D(VD)elisa試劑盒
Plant Vitamin D,VD ELISA Kit
96孔酶標包被板
48孔酶標包被板
植物維生素D(VD)ELISA試劑盒 種屬:人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。【免費代測】
植物維生素D(VD)ELISA試劑盒
廣銳Elisa試劑盒常年低價,提供免費代測超低價格、質(zhì)量!
Human salivary duct autoantibody,SDA ELISA Kit
人elisa試劑盒常年優(yōu)惠,人狼瘡抗凝抗體ELISA試劑盒,(LAC/LA)Elisa試劑盒
8-iso-PG kit,人(8-iso-PG)Elisa試劑盒
Elisa試劑盒規(guī)格,96T/48T
兔子elisa試劑盒,兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9ELISA試劑盒,(MMP-9)Elisa試劑盒
Elisa試劑盒規(guī)格,96T/48T
Elisa試劑盒規(guī)格,96T/48T
人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白抗體(AGA)ELISA試劑盒
Rat Glucose-dependent insulin-releasing polypeptide,GIP ELISA Kit
大鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒
Elisa試劑盒規(guī)格,96T/48T
GSK kit,人(GSK)Elisa試劑盒
PoFAine Interferon α,IFN-α ELISA Kit
植物維生素D(VD)ELISA試劑盒
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。
2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和11%
植物維生素D(VD)ELISA試劑盒 全國廠家直接銷售:北京、上海、廣州、深圳、江蘇、青島、山東、東北等全國各省市區(qū)均現(xiàn)貨銷售,送貨上門
植物維生素D(VD)ELISA試劑盒,Elisa價格,說明書
人角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)elisa試劑盒說明書:待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿等。
ELISA試劑盒檢測范圍:
ELISA試劑盒檢測范圍:
人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊、牛、馬、豬、其它動物細胞因子、植物細胞因子、骨代謝、細胞凋亡、激素內(nèi)分泌、活性多肽、肝纖維化、自身抗體、血栓與止血、腫瘤、自身抗體科研Elisa檢測試劑盒。
ELISA試劑盒檢測類型:雙抗體夾心法測抗原、雙抗原夾心法測抗體、間接法測抗體、競爭法測抗體、競爭法測抗原、捕獲包被法測抗體、ABS-ELISA法。
人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)ELISA檢測試劑盒每次實驗的標準曲線一般設7個不同濃度,加上空白孔,標準曲線一共需要8個孔。因此,一個48T試劑盒最多可以測定40個樣本(不做重復且一次用完),一個96T試劑盒最多可以測定88個樣本(不做重復且一次用完)?梢愿鶕(jù)實際樣本數(shù)量和實驗計劃選擇合適的產(chǎn)品規(guī)格。
操作注意事項:
1.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
2.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
3.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
4.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
5.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
7.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
8.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
9.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
人角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒說明:標本的采集及保存1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。3.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。注:標本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。標本的稀釋原則:首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標準曲線的范圍內(nèi),檢測的結(jié)果才是準確的。稀釋的過程中,應做好詳細的記錄。最后計算濃度時,稀釋了“N”倍,標本的濃度應再乘以“N”。標準品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制150 pg/ml標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。生物素標記抗體的稀釋原則:臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則:臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。操作步驟實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。3.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。5.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。8.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。注:1. 用戶在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。2. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。3. 為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜。4. 未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。5. 建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準確性。洗板方法手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次。自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。計算以標準物的濃度為橫坐標(對數(shù)坐標),OD值為縱坐標(普通坐標),在半對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。3. 一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。5. 如標本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請最后乘以稀釋倍數(shù)。6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。7. 底物請避光保存。8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。人角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒篤瑪生物相關(guān)促銷產(chǎn)品DM00658 人血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒DM00256 人類凋亡抑制因子4(API4)ELISA試劑盒 DM00895 人血管生長素(ANG)ELISA試劑盒DM00258 人角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒DM00756 人血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒DM00757 人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒DM00758 人環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒DM00759 人白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒DM00760 人活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒DM00761 人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒DM00382 人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒 DM00762 人紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒 DM00763 人紅細胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒DM00764 人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒DM00765 人鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒DM00766 人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒DM00767 人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒DM00768 人白細胞分化抗原30(CD30)ELISA試劑盒DM00769 人CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA試劑盒DM00770 人XC趨化因子受體1(XCR1)ELISA試劑盒DM00771 人二級淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒 DM00772 人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒DM00773 人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒DM00774 人骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒DM00775 人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒DM00776 人骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒DM00777 人β細胞素(BTC) ELISA試劑盒DM00778 人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒DM00779 人血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒DM00780 人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA試劑盒DM00781 人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒DM00782 人胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒DM00783 人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 DM00784 人γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 DM00516 人神經(jīng)科粒素(NG/NRGN)ELISA檢測DM00785 人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒 DM00786 人肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒 DM00787 人糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒DM00788 人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒DM00789 人生長因子(HGH)ELISA試劑盒DM00790 人膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒DM00791 人粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒DM00792 人中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒DM00793 人趨化因子(FK)ELISA試劑盒DM00794 人纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒DM00795 人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒DM00796 人堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)ELISA試劑盒DM00797 人堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒DM00798 人酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒DM00799 人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒DM00800 人白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 DM00801 人白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒DM00802 人白介素4(IL-4)ELISA試劑盒DM00803 人白介素3(IL-3)ELISA試劑盒DM00804 人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA試劑盒DM00805 人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒DM00806 人白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
人胰島素樣生長因子2(IGF-2)elisa試劑盒@新聞動態(tài) 阿儀網(wǎng) IGF-2 ELISA Kit 96T/48T
人胰島素樣生長因子2(IGF-2)elisa試劑盒@新聞動態(tài) 阿儀網(wǎng)
試劑盒產(chǎn)品說明:IGFBP(胰島素樣生長因子結(jié)合蛋)胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白是一組能夠和胰島素樣生長因子(IGF)以高親和力結(jié)合的可溶性蛋白,綜們不僅攜帶IGF,延長IGF的半衰期,而且還調(diào)控IGF的生物活性,影響IGF的分布IGFBP。血清中的IGFBP23的濃度受雌激素、甲狀旁腺激素( PTH) 、糖皮質(zhì)激素等調(diào)控,其中生長激素(GH)是IGFBP23 的主要調(diào)控因子。根據(jù)對肝、腎等組織的研究,在體外IGFBP23 的表達可由IL21、TNF2αTGF2β、維A酸、骨源性蛋白21、雌二醇、前列腺素E2、糖皮質(zhì)激素和p53等調(diào)控。公司ELISA試劑盒優(yōu)點介紹:
更靈敏、特異性好、重復性強、更環(huán)保、經(jīng)濟實惠、實驗效果穩(wěn)定
產(chǎn)品種屬介紹:蝌蚪、駱駝、海馬、蝸牛、馬、大象、鴿子、類人猿、熊貓、貂、大鼠、小鼠、牛等動植物
人胰島素樣生長因子2(IGF-2)elisa試劑盒@新聞動態(tài) 阿儀網(wǎng)產(chǎn)品包裝介紹:液體長方體盒裝
產(chǎn)品保存介紹:恒溫四度(專家建議)
肌肌酸激酶(CKM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Creatine Kinase, Muscle (CKM) 48T/96T JW-E307 Homo sapiens (Human)
核糖核酸酶T2(RNASET2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribonuclease T2 (RNASET2) 48T/96T JW-E308 Homo sapiens (Human)
N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase) 48T/96T JW-E309 Homo sapiens (Human)
激活素AB(ACVAB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Activin AB (ACVAB) 48T/96T JW-E310 Homo sapiens (Human)
α2-纖溶酶抑制因子(α2PI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI) 48T/96T JW-E311 Homo sapiens (Human)
泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) 48T/96T JW-E312 Homo sapiens (Human)
半乳糖苷酶β(GLβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Galactosidase Beta (GLb) 48T/96T JW-E313 Homo sapiens (Human)
脫氧核糖核酸酶Ⅰ樣2(DNASE1L2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Deoxyribonuclease I Like Protein 2 (DNASE1L2) 48T/96T JW-E314 Homo sapiens (Human)
谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alanine Aminotransferase (ALT) 48T/96T JW-E315 Mus musculus (Mouse)
丙酮酸激酶(PK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pyruvate Kinase, Liver And RBC (PK) 48T/96T JW-E316 Homo sapiens (Human)
補體1抑制因子(C1INH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement 1 Inhibitor (C1INH) 48T/96T JW-E317 Homo sapiens (Human)
補體成分3a受體1(C3aR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Component 3a Receptor 1 (C3aR1) 48T/96T JW-E318 Homo sapiens (Human)
前列腺素F受體(FP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Prostaglandin F Receptor (FP) 48T/96T JW-E319 Homo sapiens (Human)
α-黑色素細胞刺激素(αMSH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-Melanocyte Stimulating Hormone (aMSH) 48T/96T JW-E320 Homo sapiens (Human)
雄烯二醇(AED)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Androstenediol (AED) 48T/96T JW-E321 General
對氧磷酶1(PON1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Paraoxonase 1 (PON1) 48T/96T JW-E322 Homo sapiens (Human)
胱天蛋白酶2(CASP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Caspase 2 (CASP2) 48T/96T JW-E323 Homo sapiens (Human)
著絲粒蛋白E(CENPE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Centromere Protein E (CENPE) 48T/96T JW-E324 人胰島素樣生長因子2(IGF-2)elisa試劑盒Homo sapiens (Human)
甘膽酸(CG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cholyglycine (CG) 48T/96T JW-E325 Homo sapiens (Human)
肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Heparin Cofactor II (HCII) 48T/96T JW-E326 Homo sapiens (Human)
公司提醒:為了您獲得更理想的人胰島素樣生長因子2(IGF-2)elisa試劑盒實驗結(jié)果,請精確配制標準品及工作液A和B,以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;酶標板在溫育時應加膜覆蓋以避免液體蒸發(fā);檢測液A和檢測液B,以及底物溶液在使用前,應置于37℃溫育30分鐘待用;洗板后應盡快進行下一步操作,避免酶標板長時間處于干燥狀態(tài)。
規(guī)格96T/48T
存儲條件:2-8℃ 避光儲存
有效期:6個月(可接受預定)
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠elisa檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床
elisa試劑盒,elisa檢測試劑盒,進口elisa試劑盒-上海潤裕生物方法類型和操作步驟:
elisa可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體,②酶標記的抗原或抗體,③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法
雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法,操作步驟如下:
(1)將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
。2)加受檢標本:使之與固相抗體接觸反應一段時間,讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合,形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。
。3)加酶標抗體:使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量正相關(guān)。
(4)加底物:夾心式復合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量。
根據(jù)同樣原理,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結(jié)合物,即可用雙抗原夾心法測定標本中的抗體。
(二)間接法測抗體
間接法是檢測抗體最常用的方法,其原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下:
。1)將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
(2)加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結(jié)合,形成固相抗原抗體復合物。經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合,在洗滌過程中被洗去。
。3)加酶標抗抗體:與固相復合物中的抗體結(jié)合,從而使該抗體間接地標記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體,可用酶標羊抗人IgG抗體。
(4)加底物顯色:顏色深度代表標本中受檢抗體的量。
本法只要更換不同的固相抗原,可以用一種酶標抗抗體檢測各種與抗原相應的抗體。
(三)競爭法
競爭法可用于測定抗原,也可用于測定抗體。以測定抗原為例,受檢抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結(jié)合,因此結(jié)合于固相的酶標抗原量與受檢抗原的量呈反比。操作步驟如下:
。1)將特異抗體與固相載體連接,形成固相抗體。洗滌。
。2)待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原的混合溶液,使之與固相抗體反應。如受檢標本中無抗原,則酶標抗原能順利地與固相抗體結(jié)合。如受檢標本中含有抗原,則與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結(jié)合,競爭性地占去了酶標抗原與固相載體結(jié)合的機會,使酶標抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標抗原,保溫后,酶標抗原與固相抗體的結(jié)合可達最充分的量。洗滌。 。3)加底物顯色:參考管中由于結(jié)合的酶標抗原最多,故顏色最深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差,代表受檢標本抗原的量。待測管顏色越淡,表示標本中抗原含量越多。
凡購買elisa試劑盒,elisa檢測試劑盒,進口elisa試劑盒-上海潤裕生物等相關(guān)elisa試劑盒產(chǎn)品,我司擁有一流的技術(shù)團隊,完善的售后服務體系。公心語生物公司提供免費代測,需要代測單位的試驗材料和試劑等均須采用特快專遞形式郵寄,有低溫要求的、固定要求的,按低溫保存、固定防碎方法運輸,以確保實驗物品的安全可靠。如數(shù)量巨大,我司可以讓專業(yè)人員前往提取。詳情請與我司銷售人員聯(lián)系。
編號 | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F2304-A | 人血管生成素1(ANG-1)elisa試劑盒 | Human Angiopoietin 1,ANG-1 elisa Kit | 48T |
人血管生成素1(ANG-1)elisa試劑盒廣泛應用在免疫學檢驗的各領(lǐng)域中,我們來介紹一下更簡便的操作說明
1、人血管生成素1(ANG-1)elisa試劑盒操作方法一用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:(1).包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。 (2).加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。 (3).加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。 (4).加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 (5).終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。 (6).結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
2、人血管生成素1(ANG-1)elisa試劑盒操作方法二:用于檢測未知抗體的間接法: (1).用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 (2).加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)(3).于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。 (4).于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘 (5).于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml (6).可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。 ELISA是一種敏感性高、特異性強、重復性好的實驗診斷方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡便、結(jié)果判斷較客觀等因素,以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗又可以用于少量標本的檢測,既可以做定性試驗也可以做定量分析等優(yōu)點,已廣泛應用于微生物學、寄生蟲學、腫瘤學和細胞因子等領(lǐng)域。
3、臨床標本的收集和保存 用于ELISA測定的臨床標本最為常用的是血清(漿),有時因為特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。目前臨床上使用血清標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標本的收集,要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結(jié)果產(chǎn)生影響。如可的松在早晨4~6點之間,會有一峰值出現(xiàn):生長激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發(fā)性方式釋放,因此,在測定此類激素時,有必要在密切相連的時間間隔內(nèi)采取數(shù)份血樣本,以其中間值為測定值。又如當從臥位變?yōu)檎玖⑽粫r,血清中腎素活性將出現(xiàn)明顯增高。再如治療藥物的檢測,應根據(jù)藥代動力學選擇服藥后的最適時間抽血檢測。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物和特種蛋白等的檢測的血清標本的收集則沒有時間和體位方面的影響,只是在處理和保存方面要考慮。
(1)要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色。(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。(3)血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。(4)冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振蕩,反復顛倒混勻即可。(5)標本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。
4、試劑準備 在臨床實驗室,對試劑準備一般不太注意,通常的做法是,在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題,其直接的后果是對一些弱陽性標本的檢測出現(xiàn)假陰性。因此在ELISA測定中試劑的準備最為關(guān)鍵的是,在實驗開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20分鐘以上后,再進行測定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應步驟中,能使反應微孔內(nèi)的溫度能較快地達到所要求的高度,以滿足測定要求。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實驗室使用時對所提供的濃縮液稀釋配制,因此稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應保證質(zhì)量。此外,當試劑盒以OPD為底物時,則底物溶液應在反應顯色前臨時配制。
在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,血清樣本的加入幾乎是唯一的要使用微量加樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關(guān)鍵點是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應液界面有差異。試劑的加入在國產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出現(xiàn)重復滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象,這樣就會在孔內(nèi)的非包被區(qū)出現(xiàn)非特異吸附,從而引起非特異顯色。所以,有時候一份標本用相同的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。
四、溫育溫育是ELISA測定中影響測定成敗最為關(guān)鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結(jié)合反應在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原完全結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應一定的時間。溫育所需時間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時間相對較短。最為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。溫育這一步是臨床ELISA測定中最容易出現(xiàn)問題的步驟。通常目前國內(nèi)ELISA商品試劑盒的反應溫育時間為37℃ 30分鐘~1小時,進口ELISA試劑盒則通常為37℃ 1~2小時才能有較完全的結(jié)合,低于1小時,可能會影響測定下限。因此,關(guān)于溫育,在實際測定操作中一定要注意以下幾點:要保證在設定的溫度下有足夠的反應時間。一般來說,加完樣本和/或反應試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃,需要一定的時間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下,這段升溫時間可能還比較長,而在臨床實驗室中,很少有人注意這個問題,通常是將微孔板一放入溫箱即開始計時,這樣就很容易造成實際測定中溫育時間不夠,弱陽性樣本測不出來的問題。曾有一地處南方的血站同行提出了一個問題,就是在每一年的冬季總有那么一個多月的時間,在做HBsAg測定的室內(nèi)質(zhì)控中,測定由衛(wèi)生部臨床檢驗中心供應的1 ng/ml弱陽性樣本時,總是測不出來,不知原因為何?這可能就與南方冬天室內(nèi)溫度較低有關(guān),此時微孔板轉(zhuǎn)入溫箱后37℃溫育時間不夠,以致弱陽性樣本測定為陰性。因此,為保證37℃下足夠的溫育時間,臨床實驗室可自行確定本實驗室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內(nèi)溫度才能達到37℃,從而適當延長板條在溫箱中的放置時間。具體的做法是,用一小溫度計放置板孔反應溶液中測量觀察即可。
EK-Bioscience
Biotechnology Co., Ltd. Shanghai enzyme research
This kit is for in vitro research use, not for clinical diagnosis!
(本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷。
人胰島素(INS)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
Human(INS)ELISA Kit
CAS.NO:EK-H11985
聲明:尊敬的客戶,感謝您選用本公司的人胰島素(INS)elisa試劑盒96T產(chǎn)品。本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(INS)含量。使用前請仔細閱讀說明書并檢查試劑組分!如有疑問,請及時聯(lián)系我們。
參數(shù)規(guī)格
中文名稱 | English name | 96T/48T 含量 | 保存 |
ELISA酶標板(可拆卸) | Microelisa stripplate | 8×12 / 8×6 * | 2-8℃ |
標準品(32mU/L) | Standard | 1瓶 0.5ml * | 2-8℃ |
標準品稀釋液 | Standard diluent | 1 瓶 1.5ml * | 2-8℃ |
酶標試劑 | HRP-Conjugate reagent | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
樣品稀釋液 | Sample diluent | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
顯色劑 A 液 | Chromogen Solution A | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
顯色劑 B 液 | Chromogen Solution B | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
終止液 | Stop Solution | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
濃縮洗滌液 | wash solution | 1 瓶20ml * | 2-8℃ |
說明書 | Instruction | 1份 * |
|
封板膜 | Closure plate membrane | 2 片 * |
|
密封袋 | Sealed bags | 1個 * |
|
產(chǎn)品用途
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人胰島素(INS)水平。用純化的人胰島素(INS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(INS),再與HRP 標記的胰島素(INS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中人胰島素(INS)濃度。
標本要求
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
5. 培養(yǎng)細胞:檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
7. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
試驗所需自備物品:
1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭
3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙5.人胰島素(INS)elisa試劑盒96T
操作流程
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
16mU/L | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
8mU/L | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
4mU/L | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2mU/L | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
1mU/L | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍(48T 的20 倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
8. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
實驗目的、靈敏度、檢測范圍和重復性:
●實驗目的:測定人血清樣本中胰島素(INS)含量。
●靈敏度:最小可測 0.3mU/L。
●檢測范圍 0.5mU/L – 16mU/L。
●重復性:板內(nèi),板間變異系數(shù)均<10%。
問題分析
若實驗效果不好,請及時對顯色結(jié)果拍照,保留所用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后聯(lián)系我公司技術(shù)支持為您解決問題。同時您也可以參考以下資料:
問題描述 | 可能原因 | 相應對策 |
標準曲線梯 度差 | 吸液或加液不準 | 檢查移液器及吸頭 |
標準品稀釋不正確 | 溶解標準品稍微旋轉(zhuǎn)瓶身,輕輕混勻使粉末完全溶解 | |
洗滌不完全 | 保證洗滌時間和洗滌次數(shù)及每孔的加液量 | |
顯色很弱或 無色
| 孵育時間太短 | 保證充足的孵育時間 |
實驗溫度不正確 | 使用推薦的實驗溫度 | |
試劑體積不夠或漏加 | 檢查吸液及加液過程,保證所有試劑按順序足量添加 | |
稀釋不正確 | ||
讀數(shù)數(shù)值低 | 酶標儀設置不正確
| 在酶標儀上檢查波長及濾光片設置 |
提前打開酶標儀預熱 | ||
變異系數(shù)大 | 加液不正確 | 檢查加液情況 |
背景值高
| 檢測抗體的工作濃度 | 使用推薦的稀釋倍數(shù) |
酶標板洗滌不完全 | 重新閱讀操作手冊,保證清洗完全;如果用自動洗板機,請檢查所有的出口是否有堵塞 | |
洗液有污染 | 配制新鮮的洗液 | |
靈敏度低 | ELISA 試劑盒保存 | 按說明書要求保存相關(guān)試劑 |
讀數(shù)前未終止 | OD 讀數(shù)前應在每孔中加入終止液 |
聲明
1. 限于現(xiàn)有條件及科學技術(shù)水平,尚不能對所有原料進行全面的鑒定分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風險。
2. 最終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當時的實驗環(huán)境密切相關(guān),請務必準備充足的待測樣品。
3. 只有全部使用人胰島素(INS)ELISA試劑盒96T內(nèi)的試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守本實驗說明才會得到最佳的檢測結(jié)果。
4. 有效期:6 個月。
代測服務
凡購買我公司試劑盒,均可享受免費代測服務!
聯(lián)系時請?zhí)峁┊a(chǎn)品貨號,以便我們更高效地為您服務。 謝謝!
This kit is for in vitro research use, not for clinical diagnosis!
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠阿立新A(OrexinA)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠阿立新A(OrexinA)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 標準品稀釋液即可視為陰性對照或者空白;預處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑盒組成
| | | |
微孔酶標板 | | | |
標準品(800 pg/mL) | | | |
標準品稀釋液 | | | |
樣本稀釋液 | | | |
檢測抗體-HRP | | | |
20×洗滌緩沖液 | | | |
底物A | | | |
底物B | | | |
終止液 | | | |
封板膜 | | | |
說明書 | | | |
自封袋 | | | |
注:標準品用標準品稀釋液依次稀釋為:800、400、200、100、50、25 pg/mL
試劑的準備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;
4. 隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
結(jié)果判斷
繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
試劑盒性能
1. 性:標準品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:檢測濃度小于10 pg/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。
4. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 期:6個月
免責聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。
2. 嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。
FOR RESEARCH USE ONLY.
NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.
Intended use
This OrexinA ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures. The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at 450 nm using a spectrophotometer. In order to measure the concentration of OrexinA in the sample, this OrexinA ELISA Kit includes a set of calibration standards. The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus OrexinA concentration. The concentration of OrexinA in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.
Sample collection and storages
Serum - Use a serum separator tube and allow samples to clot for 30 minutes before centrifugation for 10 minutes at approximately 3000×g. Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃ or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles
Plasma - Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant. Centrifuge samples for 30 minutes at 3000×g at 2-8℃ within 30 minutes of collection. Store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
Cell culture supernates and other biological fluids - Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
Note: The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or granule was allowed.
Materials required but not supplied
1. Standard microplate reader(450nm)
2. Precision pipettes and Disposable pipette tips.
3. 37 ℃ incubator
Precautions
1. Do not substitute reagents from one kit to another. Standard, conjugate and microplates are matched for optimal performance. Use only the reagents supplied by manufacturer.
2. Do not remove microplate from the storage bag until needed. Unused strips should be stored at 2-8°C in their pouch with the desiccant provided.
3. Mix all reagents before using.
Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature ( 20-25°C)
Materials supplied
| | |
| | |
| | |
| | |
| | |
| | |
| | |
| | |
| | |
| | |
| | |
| | |
| | |
Note: Standard diluent with Standard diluent concentration was followed by:
800、400、200、100、50、25 pg/mL
Reagent preparation
Assay procedure
1. Prepare all reagents before starting assay procedure. It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.
2. Add standard: Set Standard wells, testing sample wells. Add standard 50μl to standard well.
3. Add Sample: Add testing sample 10μl Then add sample diluent 40μl to testing sample well; Blank well doesn’t add anyting.
4. Add 100μl of HRP-conjugate reagent to each well, cover with an adhesive strip and incubate for 60 minutes at 37°C.
5. Aspirate each well and wash, repeating the process four times for a total of five washes. Wash by filling each well with Wash Solution (400μl) using a squirt bottle, manifold dispenser or autowasher. Complete removal of liquid at each step is essential to good performance. After the last wash, remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting. Invert the plate and blot it against clean paper towels.
6. Add chromogen solution A 50μl and chromogen solution B 50μl to each well. Gently mix and incubate for 15 minutes at 37°C. Protect from light.
7. Add 50μl Stop Solution to each well. The color in the wells should change from blue to yellow. If the color in the wells is green or the color change does not
appear uniform, gently tap the plate to ensure thorough mixing.
8. Read the Optical Density (O.D.) at 450 nm using a microtiter plate reader within 15 minutes.
Calculation of results
1. This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample. The standard curve is generated by plotting the average O.D. (450 nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical (Y) axis versus the corresponding concentration on the horizontal (X) axis.
2. First, calculate the mean O.D. value for each standard and sample. All O.D. values, are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation. Construct the standard curve using graph paper or statistical software.
3. To determine the amount in each sample, first locate the O.D. value on the Y-axis and extend a horizontal line to the standard curve. At the point of intersection, draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration.
4. Any variation in operator, pipetting and washing technique, incubation time or temperature, and kit age can cause variation in result. Each user should obtain their own standard curve.
5. The sensitivity by this assay is 10 pg/mL.
6. Standard curve
Storage: 2-8℃.
validity: six months.
上海仁捷生物專業(yè)為你提供人vav3鳥嘌呤核苷酸交換因子(VAV3)elisa試劑盒
產(chǎn)品名稱:人vav3鳥嘌呤核苷酸交換因子(VAV3)ELISA試劑盒僅用科研
特色服務:人vav3鳥嘌呤核苷酸交換因子(VAV3)ELISA試劑盒僅用科研可提供免費代測服務
組成成分:試劑、酶標板、標準品等
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
產(chǎn)品價格:請'來電咨詢'173 02193538 qq:245 0868877
應用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實驗室科研及非臨床用途)
研究領(lǐng)域:炎癥研究、神經(jīng)生物學、新陳代謝、信號通路、免疫學、傳染病、其他研究。
其他產(chǎn)品種屬:人ELISA試劑盒 小鼠ELISA試劑盒 大鼠ELISA試劑盒 兔ELISA試劑盒 倉鼠ELISA試劑盒 牛ELISA試劑盒 豚鼠ELISA試劑盒 魚ELISA試劑盒 雞ELISA試劑盒 馬ELISA試劑盒 豬ELISA試劑盒犬ELISA試劑盒 羊ELISA試劑盒 昆蟲ELISA試劑盒 植物ELISA試劑盒
產(chǎn)品貨期:現(xiàn)貨
人vav3鳥嘌呤核苷酸交換因子(VAV3)ELISA試劑盒僅用科研組成及試劑配制:
1、酶聯(lián)板(assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。2、標準品(standard):2瓶(凍干品)。3、樣品稀釋液(sample diluent):1×20ml/瓶。4、生物素標記抗體稀釋液(biotin-antibody diluent):1×10ml/瓶。5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (hrp-avidin diluent):1×10ml/瓶。6、生物素標記抗體(biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)7、辣根過氧化物酶標記親和素(hrp-avidin):1×120μl/瓶(1:100)8、底物溶液(tmb substrate):1×10ml/瓶。9、濃洗滌液(wash buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。10、終止液(stop solution):1×10ml/瓶(2n h2so4)。
人vav3鳥嘌呤核苷酸交換因子(VAV3)ELISA試劑盒僅用科研
使用我公司試劑盒,只收取試劑盒的費用,其他輔助試劑全部免費。我們將根據(jù)實驗工作量和難易程度,雙方協(xié)定實驗周期,保質(zhì)保量完成委托實驗,并將實驗結(jié)果和材料用特快專遞免費寄送到您手中。從標本收集、保存、預試驗、實驗、數(shù)據(jù)分析等全實驗過程提供完整的技術(shù)指導。歡迎新老客戶來電訂購!其他人vav3鳥嘌呤核苷酸交換因子(VAV3)ELISA試劑盒僅用科研產(chǎn)品推薦:
人β羥丁酸(β-OHB)ELISA試劑盒Human Beta-Hydroxybutyric Acid,β-OHB ELISA KitELISA. 96T/48T人肌細胞生成素(MYOG)ELISA試劑盒Human myogenin,MYOG ELISA KitELISA. 96T/48T兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒rabbit adiponectin,ADP ELISA KitELISA. 96T/48T兔子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒rabbit plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA Kit ELISA. 96T/48T人降解加速因子(DAF)ELISA試劑盒Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit ELISA. 96T/48T人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISA試劑盒 Human Glutathione peroxidase,GSH-Px ELISA KitELISA. 96T/48T小鼠正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒 Mouse regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RANTES ELISA Kit ELISA. 96T/48T人T細胞活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒Human Linker for activation of T cell,LAT ELISA KitELISA. 96T/48T大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒Rat soluble Interleukin 6 receptor,sIL-6R ELISA KitELISA. 96T/48T大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒Rat Interleukin 8,IL-8 ELISA KitELISA. 96T/48T人補體1q(C1q)ELISA試劑盒Human Complement 1q,C1q ELISA KitELISA. 96T/48T人免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒Human Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit ELISA. 96T/48T人12羥二十烷四烯酸(12-HETE)ELISA試劑盒Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid,12-HETE ELISA KitELISA. 96T/48T小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒 Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA Kit ELISA. 96T/48T小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒 Mouse transforming growth factorβ2,TGFβ2 ELISA KitELISA. 96T/48T人白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 Human Interleukin 10,IL-10 ELISA Kit ELISA. 96T/48T大鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒Rat hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α ELISA KitELISA. 96T/48T人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒Human L-Selectin ELISA Kit ELISA. 96T/48T
北京冬歌生物歡迎您選購我公司的大鼠腺苷酸環(huán)化酶elisa試劑盒廠家,北京進口Rat AC)elisa試劑盒檢測血清血漿組織說明書
所有的elisa試劑盒,免費代測,全程Elisa實驗技術(shù)指導,免費代做實驗,更有年終促銷活動等您來:即日起,買Elisa試劑盒產(chǎn)品即可享受會員折扣價,活動詳情請來電咨詢我司客服人員。
【中文名稱】:大鼠腺苷酸環(huán)化酶elisa試劑盒廠家,北京進口Rat AC)elisa試劑盒檢測血清血漿組織說明書
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T
【保存條件】:2-8℃低溫保存
【保質(zhì)期】:6個月,所有試劑盒均提供最新批次。
【試劑盒成分】:酶標板,試劑,標準品等。
大鼠腺苷酸環(huán)化酶elisa試劑盒廠家,北京進口Rat AC)elisa試劑盒檢測血清血漿組織說明書
我公司的相關(guān)試劑盒的各種指標齊全涉及范圍或分類廣泛,具體如下:
人,小,鼠,大鼠,豚鼠,豬,狗,牛,羊,猴,兔,等動物種屬
樣本齊全:可以為細胞培養(yǎng)上清液,血清, 血漿,尿液,組織液,心房水,體液標本等
本產(chǎn)品的更多信息,請以下方式聯(lián)系我們:
咨詢及訂購本試劑的方法:
1.可來電向我們直接咨詢及訂購。【QQ:2507862940 熱線:400-638-1113】
2.可在本頁下方留言欄內(nèi)留言,我們會在半個工作日內(nèi)聯(lián)系您。
3.可通過郵件咨詢及訂購。
大鼠腺苷酸環(huán)化酶elisa試劑盒廠家,北京進口Rat AC)elisa試劑盒檢測血清血漿組織說明書
(注:本試劑只用于科研,我公司銷售試劑盒均有質(zhì)量保證,有任何質(zhì)量問題免費包退換,敬請垂詢!)大鼠腺苷酸環(huán)化酶elisa試劑盒廠家,北京進口Rat AC)elisa試劑盒檢測血清血漿組織說明書
牛肌酸磷酸激酶(CPK)ELISA試劑盒Kit進口特供
牛乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒Kit進口特供
牛偽狂犬病毒(PRV)ELISA試劑盒Kit進口特供
牛多巴胺(DA)ELISA試劑盒Kit進口特供
牛藍舌病毒 (bluetongue)ELISA試劑盒Kit進口特供
牛催乳素(PRL)ELISA試劑盒Kit進口特供
牛α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)ELISA試劑盒Kit進口特供
牛5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒Kit進口特供
牛免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒Kit進口特供
牛干細胞因子(SCF)ELISA試劑盒Kit進口特供
牛促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒Kit進口特供
牛羧甲基賴氨酸(CML)ELISA試劑盒Kit進口特供大鼠腺苷酸環(huán)化酶elisa試劑盒廠家,北京進口Rat AC)elisa試劑盒檢測血清血漿組織說明書