本試劑僅供研究使用 標(biāo)本：血清或血漿
大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)原理：
LDH 試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知LDH 濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將LDH 和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中LDH 的濃度呈比例關(guān)系。
大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測(cè)試劑盒內(nèi)容及其配制
| 試劑盒成份（2-8℃保存） | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 |
| 96/48人份酶標(biāo)板 | 1塊板（96T） | 半塊板（48T） | 即用型 |
| 塑料膜板蓋 | 1塊 | 半塊 | 即用型 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品：800IU/L | 1瓶（0.6ml） | 1瓶（0.3ml） | 按說明書進(jìn)行稀稀 |
| 空白對(duì)照 | 1瓶（1.0ml） | 1瓶（0.5ml） | 即用型 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 | 1瓶（5ml） | 1瓶（2.5ml） | 即用型 |
| 生物素標(biāo)記的抗LDH 抗體 | 1瓶（6ml） | 1瓶（3.0ml） | 即用型 |
| 親和鏈酶素-HRP | 1瓶（10ml） | 1瓶（5.0ml） | 即用型 |
| 洗滌緩沖液 | 1瓶（20ml） | 1瓶（10ml） | 按說明書進(jìn)行稀釋 |
| 底物A | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） | 即用型 |
| 底物B | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） | 即用型 |
| 終止液 | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） | 即用型 |
| 標(biāo)本稀釋液 | 1瓶（12ml） | 1瓶（6.0ml） | 即用型 |
自備材料
1． 蒸餾水。
2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3． 振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)
1． 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
2． 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6． 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7． 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8． 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9． 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測(cè)試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1、 血清－－－－-操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿－－－－-EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液－－-1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿－－－－-將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
5、 保存－－－－－－如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準(zhǔn)備
1． 標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：
| 800 IU/L | （6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） | 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。 |
| 400 IU/L | （5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） | 100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
| 200 IU/L | （4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） | 100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
| 100 IU/L | （3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） | 100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
| 50 IU/L | （2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） | 100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
| 25 IU/L | （1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） | 100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
| 0 IU/L | （空白對(duì)照） | 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。 |
2． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。
大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟
1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2． 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3． 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8． 取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9． 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
建議使用的實(shí)驗(yàn)方案
|
| 標(biāo)準(zhǔn)品濃度（IU/L） |
| ||||||||||
| A | 800 | 800 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
| B | 400 | 400 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
| C | 200 | 200 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
| D | 100 | 100 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
| E | 50 | 50 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
| F | 25 | 25 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
| G | 0 | 0 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
| H | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到精確的結(jié)果。
大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測(cè)試劑盒性能
1. 靈敏度：最小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的LDH 標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的LDH 含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3、檢測(cè)值范圍：0-800IU/L
4、敏感度： 1.0 IU/L
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(1)、高效、靈敏、特異的抗體；
(2)、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
(3)、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
(4)、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
(5)、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
檢測(cè)種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等。
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一、檢測(cè)原理
本試劑盒利用安普霉素抗體與安普霉素可產(chǎn)生特異性結(jié)合的性質(zhì)，先在酶標(biāo)板上預(yù)包被抗原，再加入標(biāo)準(zhǔn)品（樣本）和安普霉素抗體工作液，樣本或標(biāo)準(zhǔn)品中的安普霉素藥物與包被抗原競(jìng)爭(zhēng)安普霉素抗體，最后加入底物催化顯色。此時(shí)顯色深度與標(biāo)準(zhǔn)品（樣本）中安普霉素藥物的含量成反比。
二、檢測(cè)范圍
本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)的藥物殘留檢測(cè)產(chǎn)品,與儀器分析技術(shù)比較，能經(jīng)濟(jì)、快速地檢測(cè)出組織、肝臟、蜂蜜等樣品中安普霉素的含量。
三、注意事項(xiàng)
1、室溫低于20 ℃或試劑及樣本沒有回到室溫（20~
25 ℃）會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會(huì)出
現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象，所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
3、反應(yīng)終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚；若不慎滴漏到皮膚上，請(qǐng)盡快用水沖洗。
4、不要使用過了有效日期的試劑盒；也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過了有效期的試劑盒會(huì)引起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。
5、保存試劑盒于2~8 ℃，不要冷凍，將不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封；標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無(wú)色的發(fā)色劑對(duì)光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
6、顯色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之；0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度（450 nm）值小于0.5（A450nm< 0.5）時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。
7、在加入底物液后，一般顯色10 min即可。若顏色較淺，可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到15 min（或更長(zhǎng)），但不得超過30 min；反之，則減短反應(yīng)時(shí)間。
8、該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為25 ℃，溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
四、貯藏條件及保存期
貯藏條件：在2~8 ℃保存試劑盒。
保存期：本試劑盒有效期為12個(gè)月。
進(jìn)口 人分泌成分（SC）elisa試劑盒,人SC Elisa檢測(cè)試劑盒
人分泌成分ELISA試劑盒
英文名稱：Human secretory component,SC ELISA KIT
主要作用：研究使用
人分泌成分ELISA試劑盒 操作注意事項(xiàng)： 1． 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。2． 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6． 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7． 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8． 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9． 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
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產(chǎn)品介紹
本試劑盒系由預(yù)包被豬流行性腹瀉病毒（PEDV）抗原的微孔板和酶標(biāo)記抗原及其他配套試劑組成，應(yīng)用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測(cè)豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中流行性腹瀉病毒抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)，在包被板中加入對(duì)照血清和待檢樣本，經(jīng)溫育后，若樣品中含有豬流行性腹瀉病毒抗體，則將與包被板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后；再加入酶標(biāo)抗原，與包被板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，在孔中加TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有豬流行性腹瀉病毒抗體。豬流行性腹瀉病毒抗體檢測(cè)試劑盒【儲(chǔ)存及有效期】于2～8℃避光保存，有效期為6個(gè)月。包被板開封后請(qǐng)于2～8℃避光保存，使用期限為1個(gè)月。【試劑盒組成】 1. 預(yù)包被微孔板條 96T×12. 酶標(biāo)記物 （紅蓋） 6ml×13. 樣品稀釋液 （藍(lán)蓋） 6ml×14. 30X濃縮洗滌液 （透明蓋） 20ml×15. 底物液A （白蓋） 6ml×16. 底物液B （黑蓋） 6ml×17. 終止液 （黃蓋） 6ml×18. 陽(yáng)性對(duì)照 （紅蓋，已滅活） 0.5 ml×19. 陰性對(duì)照 （綠蓋，已滅活） 0.5 ml×110. 蓋板膜 2張11. 自封袋 1個(gè)12. 說明書 1份【樣品制備】1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。【洗滌液配制】濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫（25℃左右），并搖動(dòng)使沉淀的鹽溶解，然后用蒸餾水或去離子水作30倍稀釋。【試驗(yàn)操作方法】1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。2.取所需用量包被微孔板條，設(shè)空白對(duì)照1孔、陰陽(yáng)性對(duì)照各2孔及所需的樣品孔并編好號(hào)；未用的板條盡快密封，2～8℃保存。3.陰、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰、陽(yáng)性對(duì)照50μl；樣品孔每孔加入樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl；空白對(duì)照孔不加。4.混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。6.每孔加酶標(biāo)記物50μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘。7.洗滌，同步驟5。8.每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm（630nm作參比波長(zhǎng)）測(cè)定各孔吸光值（A450）。測(cè)定應(yīng)在終止后15分鐘內(nèi)進(jìn)行。【結(jié)果判定】1.陰性對(duì)照：正常情況下，陰性對(duì)照孔平均A值≤0.1；2.陽(yáng)性對(duì)照：正常情況下，陽(yáng)性對(duì)照孔平均A值≥1.0；3.臨界值（CUT OFF）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均A值+0.15；4.結(jié)果判定：樣品A450值大于臨界值，判為陽(yáng)性；樣品A450值小于臨界值，判為陰性。【試驗(yàn)方法的局限性】 該試驗(yàn)僅作為定性檢測(cè)豬流行性腹瀉病毒抗體。
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人磷酸果糖激酶試劑盒,人PFK ELISA Kit,北京elisa價(jià)格 說明書 北京方程生物權(quán)威ELISA試劑盒供應(yīng)商，質(zhì)量，無(wú)效退款。
樣品類型 血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣品類型 檢測(cè)方法 酶聯(lián)免疫法
特 異 性 公司ELISA試劑盒具有較高的靈敏度和出色的特異性交叉反應(yīng) 由于當(dāng)前的酶聯(lián)免疫科學(xué)技術(shù)和知識(shí)有限，現(xiàn)有技術(shù)不可能完成藥物檢測(cè)的靶抗原之間和所有其他物種的類似物。因此，交叉反應(yīng)可能仍然存在 樣 本 量 50-100 μL 實(shí)驗(yàn)時(shí)間 1–4.5h 儲(chǔ)存條件 2-8°C 儲(chǔ)存方法 可以存儲(chǔ)在2 - 8°C長(zhǎng)達(dá)1個(gè)月（專家建議：4°C恒溫保存，酶免試劑盒實(shí)驗(yàn)效果更佳）。對(duì)于長(zhǎng)期存儲(chǔ),在-20°C的存儲(chǔ)。盡量保持試驗(yàn)板在密封鋁箔袋，避免潮濕 有 效 期 6 months 工作原理人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)elisa試劑盒的原理 ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。產(chǎn)品選型人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)ELISA試劑盒的類型 ELISA可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑：（1）固相的抗菌素原或抗體，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體，稱為"結(jié)合物"（conjugate）；（3）酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。用于臨床檢驗(yàn)的ELISA主要有以下幾種類型：雙抗體夾心法測(cè)抗原操作流程雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原最常用的方法，操作步驟如下：（1） 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。（2） 加受檢標(biāo)本，保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。（3） 加酶標(biāo)抗體，保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。（4） 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色，測(cè)知標(biāo)本中抗原的量。在臨床檢驗(yàn)中，此法適用于檢驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對(duì)受檢抗原的異性抗體，就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清，包被和酶標(biāo)用的抗體最好分別取自不同種屬的動(dòng)物。如應(yīng)用單克隆抗體，一般選擇兩個(gè)針對(duì)抗原上不同決定簇的單抗，分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性，而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng)，作一步檢測(cè)。 在一步法測(cè)定中，當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時(shí)，過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合，而不再形成"夾心復(fù)合物"。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象，此時(shí)反應(yīng)后顯色的吸光值（位于抗原過剩帶上）與標(biāo)準(zhǔn)曲線（位于抗體過剩帶上）某一抗原濃度的吸光值相同（參見1.3.2，圖1-4），如按常法測(cè)讀，所得結(jié)果將低于實(shí)際的含量，這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應(yīng)（hook effect），因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線到達(dá)高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí)，反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測(cè)定標(biāo)本中含量可異常增高的物質(zhì)（例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）時(shí)，應(yīng)注意可測(cè)范圍的最高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。 假使在被測(cè)分子的不同位點(diǎn)上含有多個(gè)相同的決定簇，例如HBsAg的a決定簇，也可用針對(duì)此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物。但在HBsAg的檢測(cè)中應(yīng)注意亞型問題，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個(gè)亞型，雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應(yīng)性，這也是用單抗作夾心法應(yīng)注意的問題。 雙抗體夾心法測(cè)抗原的另一注意點(diǎn)是類風(fēng)濕因子（RF）的干擾。RF是一種自身抗體，多為IgM型，能和多種動(dòng)物IgG的Fc段結(jié)合。用作雙抗體夾心法檢測(cè)的血清標(biāo)本中如含有RF，它可充當(dāng)抗原成份，同時(shí)與固相抗體和酶標(biāo)抗體結(jié)合，表現(xiàn)出假陽(yáng)性反應(yīng)。采用F（ab＇）或Fab片段作酶結(jié)合物的試劑，由于去除了Fc段，從而消除RF的干擾。雙抗體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響，已被列為這類試劑的一項(xiàng)考核指標(biāo)。 雙抗體夾心法適用于測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原，但不適用于測(cè)定半抗原及小分子單價(jià)抗原，因其不能形成兩位點(diǎn)夾心。應(yīng)用領(lǐng)域人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)ELISA試劑盒的試劑準(zhǔn)備按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。 ELISA 中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH 計(jì)測(cè)量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。試劑的準(zhǔn)備之加樣在 ELISA 中一般有3 次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定(如間接法 ELISA)需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩 1 分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。
硝基呋喃類藥物因有非常好的抗菌作用和藥動(dòng)力學(xué)的特性，曾經(jīng)被廣泛應(yīng)用，作為禽類、水產(chǎn)和豬促生長(zhǎng)的添加劑。但在長(zhǎng)時(shí)間的實(shí)驗(yàn)研究過程中發(fā)現(xiàn)，硝基呋喃類藥物和代謝物均可以使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)生癌變和基因突變，正因?yàn)槿绱瞬艑?dǎo)致此類藥物禁止在治療和飼料中使用。呋喃它酮在1995年被禁用。
用來檢測(cè)呋喃它酮代謝物的最常用方法是LC-UV，LC-MS和LC-MS/MS。酶聯(lián)免疫方法結(jié)合了色譜技術(shù)，采用AMOZ衍生物的特異性抗體，具有很高的精確度和靈敏度，較低的操作技術(shù)要求和短暫的檢測(cè)時(shí)間，檢測(cè)樣品量大等特點(diǎn)在檢測(cè)中很好的表現(xiàn)出來。
本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)而成的檢測(cè)產(chǎn)品，能最大限度地減少操作誤差和工作強(qiáng)度。
試驗(yàn)原理
本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被呋喃它酮代謝物抗原，樣品殘留的呋喃它酮代謝物和微孔條上預(yù)包被的抗原競(jìng)爭(zhēng)抗呋喃它酮代謝物抗體，加入酶標(biāo)二抗后，經(jīng)TMB底物顯色，樣品吸光度值與其殘留物呋喃它酮代謝物呈負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出樣品中呋喃它酮代謝物的含量。
關(guān)鍵參數(shù)
試劑盒靈敏度：0.1ppb
樣品最低檢測(cè)限： 0.2ppb
回收率： 85±10%
精密度：試劑盒的變異系數(shù)均小于10%。
交叉反應(yīng)率：
藥物名稱
交叉反應(yīng)率
呋喃唑酮代謝物
100％
呋喃它酮代謝物
<0.1%
呋喃西林代謝物
<0.1%
呋喃妥因代謝物
<0.1%
溫馨提示：不可用于臨床治療。詳細(xì)請(qǐng)咨詢：15370217635