48T 96T牛山梨醇脫氫酶(SDH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒#進(jìn)口價(jià)格

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7月29日消息，據(jù)上海臻科間發(fā)表：牛山梨醇脫氫酶(SDH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被牛山梨醇脫氫酶(SDH)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色 ，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的牛山梨醇脫氫酶(SDH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。
二、牛山梨醇脫氫酶(SDH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1、優(yōu)點(diǎn)明顯   產(chǎn)品具有靈敏度高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)，具 有穩(wěn)定的重復(fù)性，吸附性能好,空白值低，并適用于血清血漿 組織勻漿等多種樣本類型的檢測(cè)，方法簡(jiǎn)單，操作方便，最大限度的節(jié)省了實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
2、品質(zhì)保障  產(chǎn)品保證質(zhì)量，出庫(kù)質(zhì)檢把控嚴(yán)格，保障提供給客戶的 100%是優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品，運(yùn)輸全程跟蹤，公司承諾有任何質(zhì)量問(wèn)題包退換，誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)，合作共贏。
3、專業(yè)定制  應(yīng)市場(chǎng)需求公司特推出專業(yè)定制elisa試劑盒的服務(wù)，全程有專業(yè)的技術(shù)老師跟蹤并和客戶保持溝通，直到定制成功為止。
4、免費(fèi)代測(cè)  公司承諾訂購(gòu)elisa試劑盒，享全程技術(shù)指導(dǎo)并可免費(fèi)代測(cè)，為您分憂。全程有專業(yè)技術(shù)老師負(fù)責(zé)代測(cè)，收到樣本一般7個(gè)工作日出結(jié)果。
5、服務(wù)周到  設(shè)立售后服務(wù)中心，24小時(shí)及時(shí)響應(yīng)，真正做到后顧無(wú) 憂，不斷完善服務(wù)體系。
 
三、牛山梨醇脫氫酶(SDH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 標(biāo)本要求
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分 鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后 一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
五、牛山梨醇脫氫酶(SDH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒 操作流程
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
六、牛山梨醇脫氫酶(SDH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項(xiàng)
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液 可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排 槍加樣。
3.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀 釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5.底物請(qǐng)避光保存。
6.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
8.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
七、牛山梨醇脫氫酶(SDH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題分析
elisa試劑盒用戶：為什么96T 的試劑盒只能檢測(cè)85個(gè)樣本，測(cè)雙標(biāo)準(zhǔn)有什么好處？    
臻科生物解答：去掉一個(gè)空白和10個(gè)標(biāo)準(zhǔn) 孔，96T 只能檢測(cè)85個(gè)樣本。雙標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照會(huì)比單標(biāo)準(zhǔn)測(cè)的更加精確。
 
ELISA試劑盒用戶：elisa試劑盒不知道濃度怎么辦？
臻科生物解答：每個(gè)試劑盒都是有對(duì)應(yīng)的 檢測(cè)范圍，比如試劑盒的范圍50-1800Pg/ml ，如果樣本高于這個(gè)檢測(cè)范圍就需要稀釋，如果低于這個(gè)檢測(cè)范圍那就測(cè)不出來(lái)了。實(shí)驗(yàn)前可以先做個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索下檢測(cè)范圍。
 
ELISA試劑盒用戶：ELISA試劑盒用什么儀器 對(duì)儀器有要求嗎？ 
臻科生物解答：1、ELISA試劑盒檢測(cè)是配套酶標(biāo)儀的，對(duì)酶標(biāo)儀沒(méi)有要求。 
       
ELISA試劑盒用戶：生物試劑與ELISA試劑盒的分別不同在哪?
臻科生物解答：ELISA試劑盒就是把該實(shí)驗(yàn)需要的試劑按一定用量和比例組合起來(lái)的成品.一般都是按做多少次的用量包裝.生物試劑那就多了,包裝大小也五花八門.
 
ELISA試劑盒用戶：elisa試劑盒可以做臨床嗎？
臻科生物解答：elisa試劑盒只能用于科學(xué) 研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷，如果你是臨床的標(biāo)本做課題實(shí)驗(yàn)完全沒(méi)問(wèn)題。 檢測(cè)原理： 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。
 
ELISA試劑盒用戶：我有98 個(gè)樣本需要多少用幾個(gè)盒子？
臻科生物解答：我們?cè)噭┖惺?nbsp;48T 96T 兩種規(guī)格 可以分別檢測(cè) 37 85個(gè)樣本，你需要一個(gè) 48T和一個(gè)96T 盒子。
 
ELISA試劑盒用戶：收集血清的時(shí)候用什么管子？    
臻科生物解答：血清一般是用促凝管，普 通離心管或者EP管都可以。
 
ELISA試劑盒用戶：ELISA試劑盒中48T和96T的區(qū)別是什么？ 
臻科生物解答：48T和96T代表試劑盒的規(guī) 格；48T 96T 可以分別檢測(cè)37 85個(gè)樣本。
 
ELISA試劑盒用戶：一個(gè)孔 需要多少量的血清？   
臻科生物解答：每個(gè)樣本的保險(xiǎn)量是50ul ，實(shí)際上樣量是10ul考慮到損耗建議至少準(zhǔn)備30ul的樣本。
如需了解更多，可聯(lián)系我司客服人員。
 
 
該公司產(chǎn)品分類： 猴子ELISA試劑盒 犬ELISA試劑盒 其他ELISA試劑盒 馬ELISA試劑盒 羊ELISA試劑盒 鴨ELISA試劑盒 鵝ELISA試劑盒 雞ELISA試劑盒 兔子ELISA試劑盒 昆蟲(chóng)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 牛ELISA試劑盒 大鼠ELISA試劑盒 小鼠ELISA試劑盒 豚鼠ELISA試劑盒 倉(cāng)鼠ELISA試劑盒 豬ELISA試劑盒 植物ELISA試劑盒 ELISA試劑盒

ELISA試劑盒專業(yè)代測(cè)牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒@最新資料

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7月25日消息，據(jù)上海臻科對(duì)行業(yè)的市場(chǎng)透露： 牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被牛山梨醇脫氫酶(SDH)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的牛山梨醇脫氫酶(SDH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

二、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

1. 品種齊全、質(zhì)量可靠、靈敏度高、穩(wěn)定性好、操作簡(jiǎn)便

2.特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

3.重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% 。

4.同城（上海）需要代測(cè)可免費(fèi)上門取樣，享送貨上門的服務(wù)。

5.根據(jù)客戶需求可以根據(jù)客戶的要求定制ELISA試劑盒。

6.臻科生物可提供全方位的售前、售中、售后技術(shù)支持,為您解決實(shí)驗(yàn)過(guò)程中遇到的問(wèn)題。

 

三、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒標(biāo)本要求

1.  血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.  組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。

注：標(biāo)本溶血會(huì)影響*后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

四、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒組成

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標(biāo)板

12孔×8條

12孔×8條

無(wú)

標(biāo)準(zhǔn)品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

無(wú)

樣本稀釋液

6mL

3mL

無(wú)

檢測(cè)抗體-HRP

10mL

5mL

無(wú)

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋

底物A

6mL

3mL

無(wú)

底物B

6mL

3mL

無(wú)

終止液

6mL

3mL

無(wú)

封板膜

2張

2張

無(wú)

說(shuō)明書(shū)

1份

1份

無(wú)

自封袋

1個(gè)

1個(gè)

無(wú)

五、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒操作流程

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.  樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

六、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

4. 底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

5. 封板膜只限一次性使用，避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。

6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。底物請(qǐng)避光保存

7. 平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

七、關(guān)于牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒特別聲明

公司長(zhǎng)期與各大高校、醫(yī)院及權(quán)威科研單位保持著良好的合作關(guān)系，公司的產(chǎn)品質(zhì)量及服務(wù)態(tài)度得到了他們的一致認(rèn)可。臻科生物本著客戶至上的原則為客戶提供高質(zhì)量高品質(zhì)的產(chǎn)品，公司承諾如有任何質(zhì)量的問(wèn)題免費(fèi)包退換（非人為因素造成的）。可根據(jù)客戶要求定制ELISA試劑盒，并承諾直到客戶滿意為止。如您想要了解更多技術(shù)參數(shù)可以直接聯(lián)系我司客服人員。

該公司產(chǎn)品分類： 兔ELISA試劑盒 犬ELISA試劑盒 其他種屬 馬ELISA試劑盒 鵝ELISA試劑盒 鴨ELSIA試劑盒 豬ELISA試劑盒 倉(cāng)鼠ELISA試劑盒 大鼠ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 小鼠ELISA試劑盒 生化試劑盒 基因組和質(zhì)粒提取試劑盒 植物ELISA試劑盒 魚(yú)ELISA試劑盒 猴子ELISA試劑盒 牛ELISA試劑盒 羊ELISA試劑盒 豚鼠ELISA試劑盒 雞ELISA試劑盒

人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒

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歡迎來(lái)電索取產(chǎn)品報(bào)價(jià)，產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)，潤(rùn)裕生物品質(zhì)服務(wù),真誠(chéng)相伴！

主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等

性狀：盒裝液體

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

ELISA試劑盒種屬齊全：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。

產(chǎn)品運(yùn)輸方面：部分現(xiàn)貨供應(yīng)，一般為快遞運(yùn)輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨

2、檢測(cè)原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。

3、服務(wù)承諾：工作時(shí)間內(nèi)免費(fèi)技術(shù)咨詢和指導(dǎo)，提供來(lái)樣檢測(cè)及免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性。

4、研究領(lǐng)域：炎癥研究、神經(jīng)生物學(xué)、腫瘤研究、新陳代謝、信號(hào)通路、免疫學(xué)、傳染病、其他研究。

如果人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒所檢測(cè)的樣本不是連續(xù)的，所以實(shí)驗(yàn)中不用的板條立即放回包裝中，密閉封口，4℃可保存1個(gè) 月。其余不用試劑應(yīng)包裝好或蓋好。在做樣本檢測(cè)前要有一個(gè)完整的計(jì)劃，如標(biāo)本編號(hào)、所測(cè)項(xiàng)目、目的等。操作時(shí)盡量使用一次性的吸頭，避免交叉污染。

主要分為以下系列：

1、細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒

2、內(nèi)分泌檢測(cè)試劑盒

3、肝纖維化檢測(cè)試劑盒

4、心肌梗塞檢測(cè)試劑盒

5、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)試劑盒

6、自身免疫檢測(cè)試劑盒

7、優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè)試劑盒

8、傳染病檢測(cè)試劑盒等等。

人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒操作步驟

方法一　用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:

1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌，下同)。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。

3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。

5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O·D值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。

方法二　用于檢測(cè)未知抗體的間接法：

用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。

人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

1.　正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說(shuō)明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

2.　在人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中，選擇好各項(xiàng)ELISA實(shí)驗(yàn)條件是很重要的，其中包括:

(1)　固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

(2) 包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1～10μg/ml。

(3)　酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。

(4)　酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。

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人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒

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人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒產(chǎn)品信息：

英文名稱：Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：SBJ-H1226

品牌：森貝伽

產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T

保存：2-8℃,避光保存

庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨供應(yīng)

有效期：六個(gè)月

注：僅用于科研,不得用于臨床診斷

 

人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法： 

1）血清－－－－-操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2）血漿－－－－-EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3）細(xì)胞上清液－－-1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4）組織勻漿－－－－-將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5）保存－－－－－－如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)：

1.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

2.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。3.使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。

4.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。5.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。7.加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

8.按照試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

9.底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

 

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