1、主題內(nèi)容與適用范圍　　GB/T 5009.28—1996, 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中糖精鈉的測(cè)定方法。　　GB/T 5009.28—1996, 本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中糖精鈉的測(cè)定。　　檢出量：液相色譜法取樣量為10g，進(jìn)樣量為10µL時(shí)，檢出量為1．5ng。　　篇　液相色譜法（法）2、食品中糖精鈉的測(cè)定 原理　　樣品加溫除去二氧化碳和乙醇，調(diào)pH至近中性，過(guò)濾后進(jìn)液相色譜儀，經(jīng)反相色譜分離后，根據(jù)保留時(shí)間和峰面積進(jìn)行定性和定量。取樣量為10g，進(jìn)樣量為10?L時(shí)檢出量為1．5ng。3、食品中糖精鈉的測(cè)定 試劑3.1　甲醇：經(jīng)濾膜（0．5µm）過(guò)濾。3.2　氨水（l＋1）：氨水加等體積水混合。3.3　乙酸銨溶液（0．02mol／L）：稱取1．54g乙酸銨，加水至1000mL溶解，經(jīng)濾膜（0．45?m）過(guò)濾。3.4　糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：稱取0．0851g經(jīng)120℃烘干4h后的糖精鈉（C₆H₄CONNaSO₂·2H₂O），加水溶解定容至100．0mL。糖精鈉含量1.0mg/mL，作為儲(chǔ)備溶液。3.5　糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：吸取糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液10．0mL放入100mL容量瓶中，加水至刻度。經(jīng)濾膜（0．45µm）過(guò)濾。該溶液每毫升相當(dāng)于0．10mg的糖精鈉。4、食品中糖精鈉的測(cè)定 儀器　液相色譜儀，紫外檢測(cè)器。5、食品中糖精鈉的測(cè)定 分析步驟5.1　樣品處理5.1.1　汽水：稱取5．00～10．00g，放入小燒杯中，微溫?cái)嚢璩ザ趸?，用氨水?/span>1＋1）調(diào)pH約7。加水定容至適當(dāng)?shù)捏w積，經(jīng)濾膜（0．45?m）過(guò)濾。5.1.2　果汁類：稱取5.00～10．00g，用氨水（1＋1）調(diào)pH約7，加水定容至適當(dāng)?shù)捏w積，離心沉淀，上清液經(jīng)濾膜（0．45µm）過(guò)濾。5.1.3　配制酒類：稱取10．0g，放小燒杯中，水浴加熱除去乙醇，用氨水（1＋1）調(diào)pH約7，加水定容至20ml，經(jīng)濾膜（0．45?m）過(guò)濾。5.2　液相色譜參考條件5.2.1　色譜柱：YWG－C184.6mm×250mm10µm不銹鋼柱。5.2.2　流動(dòng)相：甲醇：乙酸銨溶液（0.02mol/L）（5＋95）。5.2.3　流速：1mL/min。5.2.4　檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器，波長(zhǎng)230nm，靈敏度0.2AUFS。5.3　測(cè)定　　取樣品處理液和標(biāo)準(zhǔn)使用液各10?L（或相同體積）注入液相色譜儀進(jìn)行分離，以其標(biāo)準(zhǔn)溶液峰的保留時(shí)間為依據(jù)進(jìn)行定性，以其峰面積求出樣液中被測(cè)物質(zhì)的含量，供計(jì)算。5.4　計(jì)算　　式中：X₁——樣品中糖精鈉含量，g/kg；　　m₁——進(jìn)樣體積中糖精鈉的質(zhì)量，mg；　　V₂——進(jìn)樣體積，mL；　　V₁——樣品稀釋液總體積，mL；　　m₂——樣品質(zhì)量，g。　　結(jié)果的表述：報(bào)告算術(shù)平均值的三位小數(shù)。5.5　允許差　　相對(duì)相差≤10%。5.6　其他　　應(yīng)用5.2的液相分離條件可以同時(shí)測(cè)定苯甲酸、山梨酸和糖精鈉，色譜圖如下：　　（圖略）第二篇　薄層色譜法（第二法）6、食品中糖精鈉的測(cè)定 原理　　在酸性條件下，食品中的糖精鈉用提取、濃縮、薄層色譜分離、顯色后與標(biāo)準(zhǔn)比較，進(jìn)行定性和半定量測(cè)定。7、食品中糖精鈉的測(cè)定 試劑7.1?。翰缓^(guò)氧化物。7.2　無(wú)水硫酸鈉。7.3　無(wú)水乙醇及乙醇（95%）。7.4　聚酰胺粉：200目。7.5　鹽酸（1＋1）：取100mL鹽酸，加水稀釋至200mL。7.6　展開(kāi)劑7.6.1　正丁醇＋氨水＋無(wú)水乙醇（7＋1＋2）。7.6.2　異丙醇＋氨水＋無(wú)水乙醇（7＋1＋2）。7.7　顯色劑　　溴甲酚紫溶液（0.4g/L）：稱取0.04g溴甲酚紫，用乙醇（50%）溶解，加氫氧化鈉溶液（4g/L）1.1mL調(diào)節(jié)pH為8，定容至100mL。7.8　硫酸銅溶液（100g/L）：稱取10g硫酸銅（CuSO₄·5H₂O），用水溶解并稀釋至100mL。7.9　氫氧化鈉溶液（40g/L）。7.10　糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.0851g經(jīng)120℃干燥4h后的糖精鈉，加乙醇溶解，移入100mL容量瓶中，加乙醇（95%）稀釋至刻度。此溶液每毫升相當(dāng)于1mg糖精鈉（C₆H4CONNaSO₂·2H₂O）。8、食品中糖精鈉的測(cè)定 儀器8.1　玻璃紙：生物制品透析袋紙或不含增白劑的市售玻璃紙。8.2　玻璃噴霧器。8.3　微量注射器。8.4　紫外光燈：波長(zhǎng)253.7nm。8.5　薄層板：10cm×20cm或20cm×20cm。8.6　展開(kāi)槽。9、食品中糖精鈉的測(cè)定 分析步驟9.1　樣品提取9.1.1　飲料、冰棍、汽水：取10.0mL均勻試樣（如樣品中含有二氧化碳，先加熱除去。如樣品中含有酒精，加4%氫氧化鈉溶液使其呈堿性，在沸水浴中加熱除去）置于100mL分液漏斗中，加2mL鹽酸（1+1），用30，20，20mL提取三次，合并提取液，用5mL鹽酸酸化的水洗滌一次，棄去水層。層通過(guò)無(wú)水硫酸鈉脫水后，揮發(fā)，加2.0mL乙醇溶解殘留物，密塞保存，備用。9.1.2　醬油、果汁、果醬等：稱取20.0g或吸取20.0mL均勻試樣，置于100mL容量瓶中，加水至約60mL，加20mL硫酸銅溶液（100g/L），混勻，再加4.4mL氫氧化鈉溶液（40g/L），加水至刻度，混勻，靜置30min，過(guò)濾，取50mL濾液置于150mL分液漏斗中，以下按9.1.1自“加2mL鹽酸（1＋1）”起依法操作。9.1.3　固體果汁粉等：稱取20.0g磨碎的均勻試樣，置于200mL容量瓶中，加100mL水，加溫使溶解、放冷。以下按9.1.2自“加20mL硫酸銅溶液（100g/L）”起依法操作。9.1.4　糕點(diǎn)、餅干等蛋白、脂肪、淀粉多的食品：稱取25.0g均勻試樣，置于透析用玻璃紙中，放入大小適當(dāng)?shù)臒瓋?nèi)，加50mL氫氧化鈉溶液（0.8g/L），調(diào)成糊狀，將玻璃紙口扎緊，放入盛有200mL氫氧化鈉溶液（0.8g/L）的燒杯中，蓋上表面皿，透析過(guò)夜。量取125mL透析液（相當(dāng)12.5g樣品），加約0.4mL鹽酸（1＋1）使成中性，加20mL硫酸銅溶液（100g/L），混勻，再加4.4mL氫氧化鈉溶液（40g/L），混勻，靜置30min，過(guò)濾。取120mL（相當(dāng)10g樣品），置于250mL分液漏斗中，以下按9.1.1自“加2mL鹽酸（1＋1）”起依法操作。9.2　薄層板的制備　　稱取1.6g聚酰胺粉，加0.4g可溶性淀粉，加約7.0mL水，研磨3～5min，立即涂成0.25～0.30mm厚的10cm×20cm的薄層板，室溫干燥后，在80℃下干燥1h。置于干燥器中保存。9.3　點(diǎn)樣　　在薄層板下端2cm處，用微量注射器點(diǎn)10?L和20?L的樣液二個(gè)點(diǎn)，同時(shí)點(diǎn)3.0，5.0，7.0，10.0µL糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，各點(diǎn)間距1.5cm。9.4　展開(kāi)與顯色　　將點(diǎn)好的薄層板放入盛有展開(kāi)劑（7.6.1或7.6.2）的展開(kāi)槽中，展開(kāi)劑液層約0.5cm，并預(yù)先已達(dá)到飽和狀態(tài)。展開(kāi)至10cm，取出薄層板，揮干，噴顯色劑，斑點(diǎn)顯黃色，根椐樣品點(diǎn)和標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)的比移值進(jìn)行定性，根據(jù)斑點(diǎn)顏色深淺進(jìn)行半定量測(cè)定。9.5　計(jì)算　　式中：X₂——樣品中糖精鈉的含量，g/kg或g/L；　　m₃——測(cè)定用樣液中糖精鈉的質(zhì)量，mg；　　m₄——樣品質(zhì)量（體積），g（mL）；　　V₃——樣品提取液殘留物加入乙醇的體積，mL；　　V₄——點(diǎn)板液體積，mL。第三篇　離子選擇電極測(cè)定方法（第三法）10、食品中糖精鈉的測(cè)定 原理　　糖精選擇電極是以季銨鹽所制PVC薄膜為感應(yīng)膜的電極，它和作為參比電極的飽和甘汞電極配合使用以測(cè)定食品中糖精鈉的含量。當(dāng)測(cè)定溫度、溶液總離子強(qiáng)度和溶液接界電位條件一致時(shí)，測(cè)得的電位遵守能斯特方程式，電位差隨溶液中糖精離子的活度（或濃度）改變而變化。　　被測(cè)溶液中糖精鈉含量在0.02～1mg/mL范圍內(nèi)。電極值與糖精離子濃度的負(fù)對(duì)數(shù)成直線關(guān)系。11、食品中糖精鈉的測(cè)定 試劑11.1?。菏褂们坝名}酸（6mol/L）飽和。11.2　無(wú)水硫酸鈉。11.3　鹽酸（6mol/L）：取100mL鹽酸，加水稀釋至200mL，使用前以飽和。11.4　氫氧化鈉溶液（0.06mol/L）：取2.4g氫氧化鈉加水溶解并稀釋至1000mL。11.5　硫酸銅溶液（100g/L）：稱取硫酸銅（CuSO₄·5H₂O）10g溶于100mL水中。11.6　氫氧化鈉溶液（40g/L）。

11.7　氫氧化鈉溶液（0.02mol/L）：將11.4稀釋而成。11.8　磷酸二氫鈉［c（NaH₂PO₄·2H₂O）＝1mol/L］溶液：取78g磷酸二氫鈉（NaH₂PO₄·2H₂O）溶解后于500mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。11.9　磷酸氫二鈉［c（Na2HPO₄·12H₂O）＝1mol/L］：取89.5g磷酸氫二鈉（Na₂HPO₄·12H₂O）于250mL容量瓶中溶解后，加水稀釋至刻度，搖勻。11.10 總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)緩沖液：87.7mL磷酸二氫鈉溶液（1mol/L）與12.3mL磷酸氫二鈉溶液（1mol/L）混合即得。11.11　糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.0851g經(jīng)120℃干燥4h后的糖精鈉結(jié)晶移入100mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻備用。此溶液每毫升相當(dāng)于1.0mg糖精鈉（C₆H₄CONNaSO₂·2H₂O）。12、食品中糖精鈉的測(cè)定 儀器12.1　精密級(jí)酸度計(jì)或離子活度計(jì)或其他精密級(jí)電位計(jì)，到±1mV。12.2　糖精選擇電極。12.3　217型甘汞電極：具雙鹽橋式甘汞電極，下面的鹽橋內(nèi)裝入含1%瓊脂的溶液（3mol/L）。12.4　磁力攪拌器。12.5　透析用玻璃紙。12.6　半對(duì)數(shù)紙。13、食品中糖精鈉的測(cè)定 分析步驟13.1　樣品提取13.1.1　液體樣品：濃縮果汁、飲料、汽水、汽酒、配制酒等。吸取25mL均勻試樣（汽水、汽酒等需先除去二氧化碳后取樣），置于250mL分液漏斗中，加2mL鹽酸（6mol/L），用20，20，10mL提取三次，合并提取液，用5mL經(jīng)鹽酸酸化的水洗滌一次，棄去水層，層轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶，用少量洗滌原分液漏斗合并入容量瓶，并用定容至刻度，必要時(shí)加入少許無(wú)水硫酸鈉，搖勻，脫水備用。13.1.2　含蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉量高的食品：糕點(diǎn)、餅干、醬菜、豆制品、油炸食品，稱取20.00g切碎樣品，置透析用玻璃紙中，加50mL氫氧化鈉溶液（0.02mol/L），調(diào)勻后將玻璃紙口扎緊，放入盛有200mL氫氧化鈉溶液（0.02mol/L）的燒杯中，蓋上表面皿，透析24h，并不時(shí)攪動(dòng)浸泡液。量取125mL透析液，加約0.4mL鹽酸（6mol/L）使成中性，加20mL硫酸銅溶液混勻，再加4.4mL氫氧化鈉溶液（40g/L），混勻。靜置30min，過(guò)濾。取100mL濾液于250mL分液漏斗中，以下按13.1.1自“加2mL鹽酸（6mol/L）”起依法操作。13.1.3　蜜餞類：稱取10.00g切碎的均勻樣品，置透析用玻璃紙中，加50mL氫氧化鈉溶液（0.06mol/L），調(diào)勻后將玻璃紙?jiān)o，放入盛有200mL氫氧化鈉溶液（0.06mol/L）的燒杯中，透析、沉淀、提取按13.1.2操作。13.1.4　糯米制食品：稱取25.00g切成米粒狀的小塊均勻樣品，按13.1.2操作。13.2　測(cè)定13.2.1　標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：吸取0，0.5，1.0，2.5，5.0，10.0mL糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（相當(dāng)于0，0.5，1.0，2.5，5.0，10.0mg糖精鈉），分別置于50mL容量瓶中，各加5mL總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)緩沖液，加水至刻度，搖勻。　　將糖精選擇電極和甘汞電極分別與測(cè)量?jī)x器的負(fù)端和正端相連接，將電極插入盛有水的燒杯中，按其儀器的使用說(shuō)明書(shū)調(diào)節(jié)至使用狀態(tài)，在攪拌下用水洗至電極起始電位（例如某些電極起始電位達(dá)—320mV）。取出電極用濾紙吸干。將上述標(biāo)準(zhǔn)系列溶液按低濃度到高濃度逐個(gè)測(cè)定，得其在攪拌時(shí)的平衡電位值（－mV）。　　在半對(duì)數(shù)紙上以毫升（毫克）為縱坐標(biāo)；電位值（－mV）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。13.2.2樣品的測(cè)定：吸取20mL 13.1條下的提取液置于50mL燒杯中，揮發(fā)至干殘?jiān)?/span>5mL總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)緩沖液。小心轉(zhuǎn)動(dòng)，振搖燒杯使殘?jiān)芙?，將燒杯?nèi)容物全部定量轉(zhuǎn)移入50mL容量瓶中，原燒杯用少量水多次漂洗后，并入容量瓶中，加水至刻度搖勻。依法測(cè)定其電位值（－mV），查標(biāo)準(zhǔn)曲線求得測(cè)定液中糖精鈉毫克數(shù)。13.3　計(jì)算　　式中：X₃——樣品中糖精鈉的含量，g/kg或g/L；　　m₅——測(cè)定液中糖精鈉的質(zhì)量，mg；　　V₅——提取液的體積，mL；　　V₆——分取提取液的體積，mL；　　m₆——樣品的質(zhì)量或體積，g或mL。　　結(jié)果的表述：同5.4。13.4　干擾　　本法對(duì)苯甲酸鈉的濃度在200～1000mg/kg時(shí)無(wú)干擾；山梨酸的濃度在50～500mg/kg，糖精鈉的含量在100～150mg/kg范圍內(nèi)，約有3%～10%的正誤差，水楊酸及對(duì)羥基苯甲酸酯等對(duì)本法的測(cè)定有嚴(yán)重干擾。

附加說(shuō)明：　 GB/T 5009.28—1996 （食品標(biāo)準(zhǔn)） 本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生監(jiān)督司提出。   本標(biāo)準(zhǔn)法由天津市食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所、遼寧省食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所、武漢市衛(wèi)生防疫站、浙江省衛(wèi)生防疫站、四川省衛(wèi)生防疫站負(fù)責(zé)起草；第二法由食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所負(fù)責(zé)起草；第三法由上海市食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所、揚(yáng)州市衛(wèi)生防疫站、上海市南市區(qū)衛(wèi)生防疫站、廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生防疫站、太原市衛(wèi)生防疫站負(fù)責(zé)起草。本標(biāo)準(zhǔn)由委托技術(shù)歸口單位食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所負(fù)責(zé)解釋。